二联灭活疫苗范文（精选8篇）

二联灭活疫苗 第1篇

1 材料

1.1 乳化佐剂

10#白油, 购于中国石化杭州炼油厂;吐温-80, 购于上海申宇医药化工有限公司 ;硬脂酸铝, 购于中国远航试剂厂。

1.2 抗原

鸡新城疫 (La Sota株) 、禽流感 (H9亚型) 灭活抗原液, 由中国农业科学院家禽研究所研制;3批鸡新城疫灭活抗原 (批号分别为Y-N0201、Y-N0202、Y-N0203) 和3批鸡禽流感 (H9亚型) 灭活抗原 (批号分别为Y-A0201、Y-A0202、Y-A0203) , 经扬州优邦生物制药有限公司检验确认为合格抗原液。

1.3 SPF鸡

购于南京药械厂SPF鸡场, 由扬州优邦生物制药有限公司自行孵化 (HI抗体1∶4) 。

2 方法

2.1 水相、油相配比试验

取1份禽流感 (H9亚型) 灭活抗原Y-A0203与1份新城疫灭活抗原Y-N0203等量混合, 加吐温-80制成水相, 之后将水相与油相分别配成1∶2、1∶3、1∶4进行乳化。乳化过程参照《中国兽用生物制品制造与检验规程》 (2000年版) 中的乳化方法, 温度控制在25 ℃左右, 将水相按比例缓慢加到定量油相中, 边加边搅拌, 混匀后用胶体磨以4 000 r/min乳化5 min。乳化后分别取样, 用1 mL清洁吸管 (下口内径1.2 mm, 上口内径2.7 mm) 吸取25 ℃左右的疫苗1 mL令其垂直自然流出, 记录流出0.4 mL所需的时间, 8 s内为合格。将上述3种乳化比例制成的灭活苗分别接种4周龄SPF鸡 (0.2 mL/只) , 每种疫苗接种10只, 设5只对照, 免疫21 d后采血并分离血清, 检测免疫鸡HI抗体效价, 比较3种乳化比例制成的疫苗的免疫效果。

2.2 剪切速度乳化试验

按照批量化生产条件, 将水相与油相按1∶3进行混合, 分成3份进行乳化。在25 ℃条件下, 分别以转速1 500, 3 000, 4 000 r/min进行剪切、乳化 (剪切2次, 每次剪切都要倒缸) ;分别取样品10 mL加入离心管中, 以3 000 r/min离心15 min, 以不分层、管底析出水相不大于0.5 mL为合格。取样品在37 ℃放置21 d, 观察是否出现分层现象。

2.3 乳化顺序试验

分别用两种乳化顺序对抗原进行乳化:第一种是两种抗原先混合后乳化, 即将经浓缩、灭活后的鸡新城疫抗原Y-N0201、Y-N0202、Y-N0203和禽流感 (H9亚型) 抗原Y-A0201、Y-A0202、Y-A0203分别按1∶1的体积进行混合, 然后按照1∶3 (水相∶油相) 的比例进行乳化, 制成3批二联灭活苗, 批号分别为N+A0201、N+A0202和N+A0203;第2种是两种抗原先分别乳化, 然后再将乳化好的单价油苗用匀浆机等体积混合, 研制成3批二联灭活疫苗, 批号分别为N-A0201、N-A0202和N-A0203。对上述两种方法制成的二联灭活苗分别进行物理性状检验, 并分别接种4周龄SPF鸡, 每种疫苗接种10只, 0.2 mL/只, 另设5只作为对照。免疫21 d后采血并分离血清, 分别检测鸡新城疫和禽流感 (H9亚型) HI抗体效价, 以比较2种乳化方法制成的疫苗的免疫效果。

3 结果与分析

3.1 水相、油相配比试验 (见表1)

由表1可知:水相、油相比为1∶2时疫苗黏度略偏大, 0.4 mL流出时间7.4 s;水油比为1∶4和1∶3时黏度分别为4.1 s和5.4 s。在黏度尽可能低的情况下, 为保证达到抗原含量尽量高的要求, 选择1∶3的水油配比作为制造鸡新城疫、禽流感 (H9亚型) 二联灭活疫苗的最佳水油相配比。

3.2 剪切速度乳化试验 (见表2)

由表2可知:用1 500 r/min的速度剪切乳化, 样品离心后水相析出较多 (0.9 mL) , 在37 ℃放置21 d, 出现分层现象, 可能是转速较低导致剪切不彻底、不完全所致;用3 000, 4 000 r/min的速度剪切乳化, 样品离心后水相析出较少 (0.2 mL) , 在37 ℃放置21 d未出现分层现象。因此, 用该设备进行抗原剪切乳化的转速为3 000～4 000 r/min比较合适。

3.3 乳化顺序试验 (见表3、表4)

由表3、表4可以看出:两种乳化方法对于疫苗的物理性状和免疫效果的影响均没有显著差异, 均能达到质量标准要求。但用第1种乳化方法 (抗原先混合后乳化) 比第2种乳化方法 (先乳化后混合) 制备的疫苗免疫试验鸡后产生的抗体均匀度高, 整齐度好。分析原因应是乳化后用匀浆机混合, 混合的效果不好造成的, 因为溶液的混合要比胶体容易混匀, 所以为了避免因乳化方法造成疫苗的免疫效果差异, 试验确定采用抗原先混合后乳化的方法作为制造鸡新城疫、禽流感 (H9亚型) 二联灭活疫苗的乳化方法。

4 结论

在灭活疫苗的生产过程中, 疫苗的乳化工艺是关系到疫苗质量的重要步骤。由于乳化的方法不同, 疫苗的免疫效果存在很大的差异[4]。而且在进行联苗研究时, 抗原的乳化方法决定疫苗的生产工艺。因此, 在用一种新的抗原制备灭活疫苗时, 必须研究该抗原的乳化方法[5]。

经试验研究获得了鸡新城疫、禽流感 (H9亚型) 二联灭活疫苗乳化配苗工艺:首先将鸡新城疫与禽流感 (H9亚型) 这两种浓缩、灭活抗原液等量混合, 加吐温-80制成水相, 之后水相与油相按1∶3配比充分混和, 以4 000 r/min的乳化速度进行二次剪切乳化, 整个过程温度应控制在25 ℃以下。由此工艺制得的二联灭活疫苗不但具有良好的稳定性而且还有可靠的免疫保护效力。

参考文献

[1]盛泓强.乳化压力对法氏囊油佐剂疫苗分层的影响[J].上海畜牧兽医通讯, 1998 (1) ∶11-12.

[2]尚农.EDS-76灭活油乳剂疫苗的乳化工艺研究[J].畜牧兽医科技信息, 1995 (9) :3.

[3]刘洪云, 陈嘉棣.鸡新城疫法氏囊病细胞组织培养灭活油乳化两联疫苗的研制[J].上海农业学报, 1996 (1) :1-4.

[4]连京华, 何叶峰, 徐怀英, 等.鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感四联浓缩油乳剂灭活疫苗的研制[J].中国预防兽医学报, 2005, 27 (3) :209-212.

猪口蹄疫o型灭活疫苗 第2篇

我是一名江苏的养殖户，以前每次爆发o型猪口蹄疫的时候，都挺烦恼的，现在爆发o型猪口蹄疫，已经能很淡定了，根据多年的养殖经验，跟大家分享一下我家治疗o型猪口蹄疫的方案。

o型猪口蹄疫症状

病毒以蹄部水疱为特征，体温升高，全身症状明显，蹄冠、蹄叉、蹄踵发红、形成水疱和溃烂、有继发感染时，蹄壳可能脱落;病猪跛行，喜卧;病猪鼻盘、口腔、齿龈、舌、乳房(主要是哺乳母猪)也可见到水疱和烂斑;有的甚至会出现死亡现象。

o型猪口蹄疫预防

1、保持猪圈环境卫生

2、在猪生病期间不要让陌生人进入猪圈

3、针对疫区没发病的猪群紧急接种疫苗，发病的采用血清抗体做紧急治疗，能够直接中和口蹄疫病毒。大群中没发病的猪使用天行健动物药业的口蹄一针灵做紧急预防，净化体内口蹄疫病毒，防止病毒的感染，提高机体免疫力。

o型猪口蹄疫治疗

若刚起水泡，水泡没有破裂，只需用天行健动物药业的口蹄一针灵注射一次，水泡即可干瘪消失。若口鼻、蹄子周围的水泡已破溃，流血，甚至蹄壳已脱落，需用口蹄一针灵注射两次，同时防止心肌炎的继发。水泡破溃处可结痂。结痂脱落后完全恢复正常。

二联灭活疫苗 第3篇

1材料与方法

1.1材料

1.1.1试验用疫苗鸡新城疫-禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗由福州大北农生物技术有限公司自制,批号:SY2015007。

1.1.2试验用鸡商品肉鸡160羽,由圣农集团孵化厂提供。

1.2试验方法

1.2.1试验分组小鸡出壳后由本公司养至3日龄,选择健康有活力的160羽鸡。随机选40羽编为A组,即3日龄免疫组;随机选40羽编为B组,即7日龄免疫组;随机选40羽编为C组,即14日龄免疫组;随机选40羽编为D组,即空白对照组。并在每羽鸡上打上翅标编号,各组试验鸡分开饲养。

1.2.2免疫方法将A、B、C组商品肉鸡分别于3、7、14日龄免疫本公司自制的鸡新城疫-禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗,每羽颈部皮下注射0.2 m L;对照组均不免疫,作为空白对照。

1.2.3抗体监测各免疫组与对照组均随机选择10羽鸡固定采血进行监测抗体,均于3、7、14、21、28、35、42日龄采血检测新城疫与禽流感抗体。

1.2.4抗体检测方法抗体检测用红细胞凝集抑制试验的方法。具体步骤:用PBS将待检血清做2倍系列稀释,加入含4HAU的血凝素抗原液,并设PBS和4HAU血凝素抗原液对照,充分振摇后,置室温下至少20 min或在2~8℃下40~60 min;再加入1%鸡红细胞悬液,置室温20~40 min或置2~8℃40~60 min,当红细胞对照孔中的红细胞呈显著钮扣状时判定结果,以使红细胞凝集被完全抑制的血清最高稀释度作为判定终点。

1.2.5攻毒保护试验方法免疫组与对照组于21、28、35日龄随机选择10羽鸡进行禽流感强毒攻毒,攻毒使用的流感强毒为市场中分离的流行强毒株,将强毒按10倍稀释后,每羽静脉注射0.2 m L,攻毒后5 d,采集鸡泄殖腔棉拭纸,将棉拭纸液体样冻融3次,高速离心15 min(10 000 r/min),每个离心后样品接种10日龄鸡胚5枚,每胚接0.2 m L,培养72 h,收取鸡胚液,测HA效价,HA≥1:16作为攻毒不保护的标准,对病毒感染为阴性的鸡胚,应再肓传一次,再测HA效价。

2结果

2.1新城疫与禽流感抗体监测结果从新城疫与禽流感抗体监测结果(见表1、图1-图2)可以看出,对照组随鸡日龄增加,新城疫与禽流感抗体逐渐下降,42日龄时下降至0;而不同免疫组新城疫与禽流感抗体均先下降,21日龄左右开始上升,35日龄时新城疫与禽流感抗体升至6log2以上。21日龄时3日龄免疫组新城疫抗体最高,28日龄时三组免疫组新城疫抗体非常接近,35日龄后14日龄免疫组新城疫抗体最高;14、21日龄时3日龄免疫组禽流感抗体最高,28日龄后,免疫日龄大的组禽流感抗体越高。

2.2禽流感攻毒保护试验结果从禽流感攻毒保护结果(见表2、图3)看出,对照组在21、28、35日龄攻毒时,攻毒保护率在20%以下;3日龄免疫组的免疫效果最好,21、28、35日龄的攻毒保护率均是100%;7日龄免疫组在28日龄攻毒时,攻毒保护率只达70%;14日龄免疫组在21日龄攻毒时,攻毒保护率只达30%。

3结论与讨论

1)吴庭才等[5]研究表明,商品肉鸡在7日龄后禽流感母源抗体随雏鸡日龄的增加而迅速下降,至28日龄时已趋于消失。攻毒试验中,当禽流感HI效价为6log2左右时,保护率为100%;在4log2时,保护率仅50%;在2log2左右时,保护率只有20%。从本试验中可以看出,雏鸡随日龄增加流感抗体逐渐下降,容易感染禽流感,免疫新城疫-禽流感二联灭活苗后,流感抗体先下降,至21日龄时最低,在3log2以下,只有3日龄免疫组达到3log2,随后抗体开始上升,28日龄均达4log2以上;3日龄免疫组在21日龄时虽然抗体只达3log2,但对攻毒仍可达100%保护,说明使用该产品在抗体不高时仍可达到较好的攻毒保护率。在疫苗的使用过程中,制定合理的免疫程序也是个关健,理论上机体越早免疫就越早产生抗体,越早产生免疫保护力,但也应考虑机体免疫器官未发育完全可能会造成免疫效果不佳的情况。

2)从禽流感抗体监测结果可以看出,3日龄免疫组在14、21日龄时抗体最高,21日龄后各免疫组的抗体越来越接近;在35、42日龄时14日龄免疫组的抗体最高。这一结果表明,早日龄免疫,在早期抗体水平高,到后期时迟免疫组抗体上升快,而且高,可能与免疫日龄大时机体的免疫器官发育更完全有关。

3)从不同组攻毒保护结果看,3日龄免疫组不同时间攻毒的保护结果最好,均达100%,可以说无空档期。虽各时间的抗体不一定最高,但攻毒保护率最高,若要保护40几日龄上市的肉鸡,需尽早免疫新-流二联灭活苗;若要保护40日龄以上的蛋鸡,可选择两周免疫,最终可以产生更高的抗体水平,达到更好的免疫效果。

4)当前,低致病性禽流感毒株在不断发生变化甚至发生变异,部分养殖厂反映禽流感灭活苗不能产生完全免疫保护,但是有研究认为,虽然H9N2亚型禽流感病毒发生了一定变异,但是现有疫苗仍能提供有效保护[6]。万晓朋等[7,8]研究表明,H9N2毒株间有很好的免疫交叉保护性,灭活疫苗免疫鸡不仅能够完全抵抗同源毒株的攻击,对异源毒株的攻击也可产生较好的免疫保护。本试验疫苗使用的禽流感HP株,用HP毒株制备的新城疫-禽流感二联灭活疫苗免疫3日龄商品肉鸡,21、28、35日龄时进行禽流感强毒攻毒,仍有很好的攻毒保护效果;本试验攻毒使用的是市场流行毒株,对于其他毒株攻毒有保护效果。王新卫等[9,10,11,12]进行不同毒株攻毒保护试验,虽然攻毒株与疫苗株在抗原性上有差异,但HP株仍能够对毒力、抗原差异的其他禽流感流行毒株的攻毒产生有效保护。

5)在本试验中,免疫鸡新城疫-禽流感(H9N2HP株)二联灭活疫苗后,商品肉鸡产生抗体均可达到较高的水平。免疫效果不仅要参考抗体水平,更重要的是要看攻毒保护结果,本试验中安排了流感攻毒保护试验,结果攻毒保护率也较高,免疫效果好。本试验是在商品肉鸡上进行的,在蛋鸡上的效果还需通过进一步的试验观察,制定新的免疫程序,以获得满意的免疫效果。

摘要：使用鸡新城疫-禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗分别免疫3、7、14日龄三组商品肉鸡各40羽,同时设一组空白对照组。各免疫组及对照组于3、7、14、21、28、35、42日龄采血检测新城疫、禽流感抗体,于21、28、35日龄进行禽流感病毒攻毒,对比不同日龄免疫组的抗体消涨情况及不同日龄禽流感攻毒结果。发现对照组随鸡日龄增加,新城疫与禽流感抗体逐渐下降,在42日龄时下降至0,而不同免疫组新城疫与禽流感抗体均先下降,21日龄左右开始上升,至35日龄新城疫与禽流感抗体升至6log2以上。3日龄免疫组的禽流感免疫保护效果最好,21、28、35日龄时禽流感强毒攻毒保护率均达100%;7日龄免疫组在21、35日龄时禽流感强毒攻毒保护率均达100%,28日龄时禽流感强毒攻毒保护率达70%;14日龄免疫组在28、35日龄时禽流感强毒攻毒保护率均达100%,21日龄时禽流感强毒攻毒保护率只达30%。试验表明,商品肉鸡选择3日龄免疫鸡新城疫-禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗时禽流感免疫保护效果最好,采用3日龄免疫程序可以提高新城疫与禽流感的免疫保护效果,减少养殖业的经济损失。

关键词：鸡新城疫、禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗,肉鸡,免疫效果

参考文献

[1]荣骏弓,孙进忠,刘守川,等.鸡新城疫病毒、禽流感病毒二联灭活疫苗免疫试验[J].中国家禽,2007,29(16):49-52.

[2]卡尔尼克B W.禽病学[M].10版.高福,苏敬良,译.北京:中国农业出版社,1999:742-771.

[3]甘孟侯.禽流感[M].2版.北京:中国农业出版社,2002:1-14.

[4]童海兵,张小荣,吴艳涛,等.H9N2亚型禽流感灭活疫苗的免疫效果评价[J].中国家禽,2010,32(20):22-25.

[5]吴庭才,张春杰,郭向鹏.禽流感母源抗体消长规律和免疫保护抗体临界值的测定[J].洛阳农业高等专科学校学报,2002,22(3):243-244.

[6]荣骏弓,孙进忠,刘守川,等.鸡新城疫病毒(La sota株)、禽流感病毒(H9亚型,HL)二联灭活疫苗免疫试验与禽流感流行株交互免疫研究[C]//中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会论文集,2007:531-534.

[7]万晓朋,曾显营,田国彬,等.H9N2亚型禽流感流行株灭活疫苗种毒的筛选[J].中国预防兽医学报,2010,32(4):276-278.

[8]孙进忠,荣骏弓,刘守川,等.禽流感病毒H9N2亚型HL株与H9亚型流行株抗原相关性及交互免疫的研究[J].家禽科学,2007(3):11-13.

[9]王新卫,杨大光,王川庆等.H9N2亚型禽流感病毒不同流行株抗原性和免疫原性的比较研究[J].畜牧兽医学报,2011,42(11):1584-1590.

[10]景小冬,章振华,李林,等.H9亚型禽流感病毒流行毒株交叉免疫攻毒保护试验[J].中国畜牧兽医,2010,37(6):134-137.

[11]胡江锋,焦铁军,刘淑红,等.鸡新城疫病毒、禽流感病毒二联灭活疫苗与同类产品的免疫效力比较[J],中国兽药杂志,2011,45(11):9-11.

二联灭活疫苗 第4篇

1 材料

1.1 疫苗

浓缩新支二联灭活疫苗 (批号为200701) , 北京市农林科学院畜牧兽医研究所免疫与预防研究室制备、提供;市售新支二联灭活疫苗 (批号为061201) , 洛阳普莱柯生物工程有限公司生产;H120活疫苗 (批号为20050901) , 乾元浩生物股份有限公司生产。

1.2 抗原

鸡传染性支气管炎 HI抗原、标准血清, 北京市农林科学院畜牧兽医研究所免疫与预防研究室制备, 检测方法参照姜北宇等[3]介绍的方法。

1.3 试验动物

21日龄SPF鸡, 购于北京市实验动物研究中心。

2 方法

将50只SPF鸡分为5组, 每组10只, 分别进行以下处理:第1组于21日龄时颈背部皮下注射浓缩新支二联灭活疫苗, 每只0.5 mL;第2组于21日龄时颈背部皮下注射市售新支二联灭活疫苗, 每只0.5 mL;第3组于21日龄时先用H120活疫苗滴鼻、点眼免疫, 每只1羽份, 然后颈背皮下注射浓缩新支二联灭活疫苗, 每只0.5 mL;第4组先于21日龄时滴鼻、点眼免疫H120活疫苗, 每只1羽份, 42日龄免疫浓缩新支二联灭活疫苗, 每只0.5 mL;第5组先于21日龄时滴鼻、点眼H120活疫苗, 每只1羽份, 42日龄免疫市售新支二联灭活疫苗, 每只0.5 mL。最后于42, 63日龄采血, 分离血清测定IB HI抗体, 比较不同免疫方法对IB的免疫效果。

3 结果 (见表1)

由表1可知:仅用新支二联灭活疫苗免疫, 63日龄时IB HI抗体水平只有24.3～5.4, H120活疫苗与浓缩新支二联灭活疫苗同时免疫, 63日龄时IB HI 抗体水平只有25.6;而用H120活疫苗进行首免, 不管用哪种新支二联灭活疫苗进行二免, 抗体水平均可以达到26.4～6.7。

4 讨论

目前, 预防鸡传染性支气管炎常用的疫苗有H52、H120, 以滴鼻、点眼或饮水途径免疫, 雏鸡于2周龄接种H120苗, 5周龄加强免疫1次, 种鸡在2～4月龄用H52苗接种1次。开产前接种油乳剂灭活苗加强免疫, 可使子代雏鸡在3周内获得母源抗体的保护[4]。根据此次研究的结论, 笔者认为预防传染性支气管炎的最佳免疫方法应是先用活疫苗进行基础免疫, 3周后再用灭活苗进行加强免疫。

参考文献

[1]甘孟侯.中国禽病学[M].北京:中国农业出版社, 1999:43-48.

[2]王振亚, 王睿, 王彦斌, 等.一起鸡传染性支气管炎的RT-PCR诊断[J].中国畜牧兽医, 2009, 36 (9) :134-135.

[3]姜北宇, 郑世兰, 刘月焕, 等.鸡传染性支气管炎HA抗原的制备及HI试验方法的建立[J].实验动物科学与管理, 1998, 15 (3) :13-18.

二联灭活疫苗 第5篇

1 材料和方法

1.1 试验用疫苗添加了免疫增强剂的新城疫、禽流感 (H9 亚型) 二联灭活疫苗 (La Sota株+HP株) , 批号为SY2015001-A; 未添加免疫增强剂的新城疫、禽流感 (H9 亚型) 二联灭活疫苗 (La Sota株+HP株) , 批号为SY2015001-B。

1.2 试验用鸡

1.2.1 SPF鸡组由北京梅里亚维通试验动物有限公司供应SPF种蛋, 自行孵化出雏后置隔离器内饲养至所需日龄。 7 日龄、28 日龄分别免疫SY2015001-A、SY2015001-B各10 羽, 每羽颈部皮下注射0.2 m L, 设5 羽鸡做空白对照组。 在免后6、10、15、21、28、35 d采血并测定新城疫与禽流感抗体。

1.2.2 商品鸡组1 日龄雏鸡购自闽清某鸡场, 购回后饲养至隔离器中。 7 日龄分别免疫SY2015001-A、SY2015001 -B各10 羽, 每羽颈部皮下注射0.2 m L, 设5 羽鸡做空白对照组。 在免前及免后6、10、15、21、28、35 d采血并测定新城疫与禽流感抗体。

1.3 检验用材料新城疫 (La Sota株) 抗原由福州大北农生物技术有限公司 (以下简称为福州大北农) 生产, 批号为BS2015002, HA血凝价为29; 禽流感 (H9 亚型, HP株) 抗原由福州大北农生产, 批号为BS2015002, HA血凝价为29; 鸡新城疫阳性血清HI试验对照品, 购自中国兽医药品监察所, 批号为s0121407;禽流感阳性血清, 由福州大北农质检部制备, 批号为20150315, 血清效价HI 210。

1.4 抗体测定方法参照 《 中华人民共和国兽药典》红细胞凝集抑制试验法[2]及福州大北农生物技术有限公司SOP-009-WS-092-01 鸡红细胞凝集抑制试验操作规程。

2 结果

2.1 SPF鸡7 日龄、28 日龄抗体消长规律比较对于7 日龄SPF鸡, 添加免疫增强剂的新-流二联灭活苗与未添加免疫增强剂的新-流二联灭活苗抗体增长时间与抗体滴度无明显差异;28 日龄SPF鸡, 添加免疫增强剂的新-流二联灭活苗与未添加免疫增强剂的新-流二联灭活苗抗体增长时间与抗体滴度有显著差异, 添加免疫增强剂的新-流二联灭活苗组在抗体滴度上高于未添加免疫增强剂的新-流二联灭活苗, A组ND抗体在10、15、21、28、35 d比B组分别高0.2log2、0.6log2、1.5log2、0.9log2、0.5log2;A组AI抗体比B组分别高0.1log2、0.3log2、1.2log2、1.0log2、0.6log2。 见表1-表2。

2.2 商品蛋鸡7 日龄抗体消长规律比较添加免疫增强剂的新-流二联灭活苗组 (A组) 与未添加免疫增强剂的新-流二联灭活苗组 (B组) 在免后15 d出现明显区别, A组比B组抗体显著提高, A组ND抗体在15、21、28、35 d比B组分别高1.6log2、2.0log2、1.9log2、3.7log2;A组AI抗体比B组分别高1.3log2、2.7log2、1.8log2、2.0log2。 见表3。

3 讨论

3.1 免疫增强剂对新流二联灭活苗免疫效果的影响对28 日龄SPF鸡及7 日龄商品蛋鸡的抗体消长规律进行比较, 免疫增强剂对28 日龄SPF鸡、7日龄商品蛋鸡新城疫抗体及禽流感抗体都有明显的免疫增强作用。

3.2免疫增强剂对试验鸡的免疫效果比较添加免疫增强剂的疫苗对7日龄SPF鸡的效果不明显, 与未添加免疫增强剂的疫苗抗体水平一致;对28日龄SPF鸡的效果明显, 但比7日龄商品蛋鸡差。由此可见, 免疫增强剂在免疫系统越完善的情况下免疫效果越好, 在有抗体刺激的情况下比没有抗体的情况下免疫效果要好。

参考文献

[1]雷成连, 韩文瑜.免疫增强剂的研究进展[J].中国兽药杂志, 2002, 36 (6) :36-38.

二联灭活疫苗 第6篇

随着畜牧业产业结构调整的不断深入, 我区养禽业有了较大的发展, 规模养禽已成为当今我区畜牧业发展的突出的亮点。全区鹌鹑年饲养量从上世纪80年代中期的1000万羽增至2014年的3000多万羽。全区规模鹌鹑养殖大户发展到800多户, 其中2000羽以上的鹌鹑养殖户300多家, 5000羽以上的鹌鹑养殖户100多家, 1万羽以上的鹌鹑养殖户70多家。但目前国内还没有规范的用于鹌鹑的禽流感免疫程序, 传统使用禽流感灭活疫苗免疫, 因灭活疫苗仅能注射免疫, 而鹌鹑的个体小, 注射免疫困难, 导致了免疫密度低, 免疫效果差, 存在一定的疫情隐患。

禽流感、新城疫重组二联活疫苗 (r LH5-6株) 是哈尔滨维科生物技术开发公司研制生产的一种新型疫苗, 具有注射、滴鼻、点眼、饮水等免疫方式的多样性, 因此, 通过对禽流感、新城疫重组二联活疫苗在鹌鹑群中进行注射、滴鼻、点眼、饮水等不同方式的应用试验, 制订科学的、规范的免疫程序及配套的免疫操作规范和消毒规范等, 以实现鹌鹑高致病性禽流感、新城疫免疫科学、经济、高效目标, 我们开展了禽流感、新城疫二联活疫苗在鹌鹑中的应用试验研究, 现将试验结果报告如下并作相关探讨:

1 试验分组、方法及抗体检测

1.1 试验在3个养殖场, 每场分5组进行

第1组:7日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗1羽份滴鼻, 22日龄新城疫—禽流感重组二联活疫苗2羽份饮水, 50日龄禽流感H5N1灭活疫苗0.5m L肌注。

第2组:7日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗1.5羽份滴鼻, 22日龄禽流感H5N1灭活疫苗0.5m L肌注。

第3组:7日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗1羽份饮水, 22日龄禽流感H5N1灭活疫苗0.5m L肌注。

第4组:15日龄禽流感H5N1灭活疫苗0.3m L肌注, 35日龄禽流感H5N1灭活疫苗0.5m L肌注。

第5组:7日龄新城疫Ⅳ系活疫苗1羽份滴鼻, 22日龄禽流感、新城疫感重组二联活疫苗2羽份饮水。

1.2 试验用疫苗

禽流感、新城疫重组二联活疫苗 (r LH5-6株) 由哈尔滨维科生物技术开发公司生产, 其批准文号为:兽药生字 (2012) 080012194。重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗由哈尔滨维科生物技术开发公司生产, 其批准文号为:兽药生字 (2014) 080012228。鸡新城疫活疫苗 (La Sota株) 由哈药集团生物疫苗有限公司生产, 其批准文号为:兽药生字 (2011) 080072007。

1.3 检测方法

采用血凝抑制试验 (HI) 的方法监测H5N1禽流感及新城疫免疫抗体。

在试验过程中同时检测ND和禽流感H5N1二种抗体, 分别选择一免后的7、14、21、28、35d进行抗体监测, 获取ND和禽流感H5N1二种抗体消长规律。进行二免的选择二免后的10、20、30、45、60、80、100d进行监测, 观察抗体变化情况, 获取ND和禽流感H5N1二种抗体消长规律。进行三次免疫的选择三免后分别在10、20、35、50、70、90、110、125、140、150d进行免疫抗体监测, 获取ND和禽流感H5N1二种抗体消长规律。

1.4 应用试验时间

2015年2月27日~6月2日。

2 试验结果

每组每次采样监测20羽, 检测的抗体滴度用log2表示。

3 小结

3.1通过应用试验, 禽流感、新城疫重组二联活疫苗 (r LH5-6) 对鹌鹑的免疫效果不很理想, 免疫抗体效价偏低, 同时说明鹌鹑对禽流感病毒易感性不高。

3.2选择合理的免疫方式和合理加大免疫剂量, 可以缩短免疫保护空白期, 提高免疫抗体滴度和免疫合格率, 延长免疫抗体的半衰期, 进而可以实现延长免疫保护期的目的。

3.3在应用禽流感、新城疫重组二联活疫苗 (r LH5-6株) 对鹌鹑进行免疫的过程中, 选择用禽流感灭活苗和新城疫弱毒苗进行加强免疫可以提高免疫效果。

3.4根据上述研究的结果, 建议蛋用鹌鹑禽流感H5N1和新城疫的免疫, 按照以下程序进行:19日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗1羽份饮水, 26日龄禽流感H5N1灭活疫苗0.3m L肌注, 90日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗肌肉注射1羽。

肉用鹌鹑禽流感H5N1和新城疫的免疫, 按照以下程序进行:7日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗1羽份滴鼻, 24日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗2羽份饮水。

4 讨论

4.1 关于首免日龄选择问题的探讨。

农业部推荐禽流感H5N1灭活疫苗首免日龄是7~14日龄。国内禽流感H5N1灭活疫苗生产厂家推荐的免疫剂量是7~20日龄0.3m L/羽, 21日龄以上是0.5m L/羽。在实际免疫过程中, 雏鹌鹑注射灭活苗非常困难, 推广难度大。根据试验已得的结果, 本课题组认为肉用鹌鹑在7日龄、种鹌鹑和蛋鹌鹑在15~20日龄以后进行首免疫是比较好的选择。

4.2 鹌鹑免疫抗滴度维持在多少范围内对鹌鹑的保护比较安全, 这个问题需进行攻毒试验才能得出结论。

4.3 种鹌鹑的免疫抗体滴与同一检测时间种蛋出雏的母源抗体之间的差距也是探讨内容之一。

摘要：目前国内还没有规范的用于鹌鹑的禽流感免疫程序, 传统使用禽流感灭活疫苗免疫, 而鹌鹑的个体小, 注射免疫困难, 导致了免疫密度低, 免疫效果差, 存在一定的疫情隐患。通过应用禽流感、新城疫重组二联活疫苗 (r LH5-6株) 在鹌鹑群中进行注射、滴鼻、点眼、饮水等不同方式的应用试验, 制订科学的、规范的免疫程序, 以实现鹌鹑高致病性禽流感、新城疫免疫科学、经济、高效目标。

灭活疫苗在生产中的应用 第7篇

病原微生物经理化方法灭活后, 仍然保持免疫原性, 接种后使动物产生特异性抵抗力, 这种疫苗称为灭活疫苗或死疫苗。由于灭活疫苗接种后不能在动物体内繁殖, 因此, 使用接种剂量较大, 免疫期较短, 需加入适当的佐剂以增强免疫效果。目前, 所使用的灭活疫苗主要是油佐剂灭活疫苗和氢氧化铝胶灭活疫苗。油佐剂灭活疫苗是以矿物油为佐剂与经灭活的抗原液混合乳化制成, 免疫效果较好, 免疫期较长。氢氧化铝胶灭活疫苗 (铝胶苗) 是将灭活后的抗原液加入氢氧化铝胶制成, 制备较方便, 价格较低, 免疫效果良好, 但难吸收, 在体内形成结节, 影响肉产品的质量。

灭活疫苗的优点: (1) 疫苗的病原体已灭活, 不会出现增殖或致病力增强的现象。 (2) 避免使用非无特异病原体胚蛋生产的疫苗, 造成人为传播蛋传递性疾病。 (3) 同一剂量逐只接种畜禽, 使免疫水平一致。 (4) 贮存条件不如弱毒疫苗苛刻, 保存期较长, 多种灭活疫苗可制成联合疫苗使用, 不会导致某些弱毒疫苗混合使用时出现的病毒干扰现象。缺点: (1) 成本比弱毒疫苗高, 已灭活的病原体不会增殖, 故每个接种剂量应含较多的抗原, 生产灭活疫苗的佐剂也使成本增加。 (2) 逐只免疫注射费时费工, 目前灭活疫苗还不能群体免疫 (如饮水、气雾法) 。 (3) 免疫效果次于活疫苗, 注射次数多、接种量大, 有的灭活疫苗接种后副作用较大。 (4) 注射疫苗的操作不正确, 会引起局部组织的反应, 或损伤肌肉、神经和内脏器官, 须掌握正确的接种技术。

灭活疫苗应贮存在2~7℃的阴暗处, 使用前升至室温, 可减少对畜禽的应激, 接种前充分摇匀。用于接种的注射器及连接疫苗瓶的胶管应能耐高温, 便于每次使用后彻底消毒。宜使用短针头, 避免接种时伤及禽的骨胳或刺入胸腔组织, 也不易伤及接种者。操作不熟练或过快, 接种者有可能无意将灭活疫苗误注入自己手指上, 虽疫苗本身无传染性, 但不及时处理, 伤口易被细菌感染。预先制定免疫程序, 确定免疫时间, 认真按照说明书操作。在腿肌接种疫苗时, 插入针头的方向应与腿骨平行, 以免损伤骨胳、肌腱及血管。胸肌部位接种时, 入针要向头端并靠近龙骨前端的胸肌, 因为后部胸肌较薄, 针头容易插入胸腔, 甚至刺伤肝脏。皮下接种部位在颈后中线处, 因颈两侧有血管、颈肌及神经, 故不宜在侧面接种, 否则易引起水肿、扭颈等, 针头插入时不要靠近及刺向头部。

二联灭活疫苗 第8篇

关键词：禽流感,禽流感—新城疫重组二联活疫苗,免疫效果

禽流感 (Avian Influenza) 、新城疫是一种世界范围的禽类疫病，曾给养禽生产造成了巨大的经济损失，是养禽业的最大威胁。世界各国政府都十分重视，世界动物卫生组织 (OIE) 将该病列为A类疫病，我国已将其列为一类动物疫病。我国使用的禽流感疫苗为灭活油佐剂疫苗，免疫时只能采用注射的方法。这样既增加了免疫的工作量，又使免疫程序更为复杂，给养禽生产带来了不便。目前我国成功地研制了禽流感新城疫重组二联活疫苗 (rL-H5株) 。本试验参照北京市既定的蛋鸡高致病性禽流感、新城疫的免疫程序，用禽流感新城疫重组二联活疫苗 (rL-H5株) 与重组高致病性禽流感H5N1 (Re-1) 株、新城疫弱毒苗(LaSota株) 对蛋鸡进行免疫，通过免疫应激反应观察、抗体效价检测，以评价该疫苗的实际免疫效果，探索免疫方案，指导养禽生产中的免疫工作。

1 材料与方法

1.1 试验动物

同一批次海兰褐1日龄蛋鸡雏800只由北京市昌平区某种鸡场提供。

1.2 疫苗

禽流感新城疫重组二联活疫苗 (rL-H5株) (批号2007013) 、重组高致病性禽流感H5N1 (Re-1株) 灭活疫苗 (批号2007005) 、新城疫弱毒疫苗 (LaSota株) (批号200728) 。以上疫苗由某生物股份技术公司生产。

1.3 抗体监测试剂

禽流感H5N1 (Re-1) 、新城疫抗原及阳性血清，购自中国农科院哈尔滨兽医研究所，批号分别为：20070113、2007057;鸡红细胞悬液购自北京某实验动物中心的SPF级公鸡红血球。

1.4 试验分组

将800只蛋鸡雏分为4组，每组200只，在同一鸡舍、同一饲养环境、同一蛋鸡日常免疫程序、同一饲养管理条件下进行饲养(详见表1)ㄢ

1.5 疫苗免疫

按照北京市蛋鸡高致病性禽流感和新城疫的免疫程序，使用同一批次的疫苗对试验鸡群进行免疫，1组滴鼻和点眼新城疫弱毒疫苗 (LaSota株) 各1羽份;2组滴鼻和点眼禽流感新城疫重组二联活疫苗 (rL-H5株) 各1羽份;3组肌肉注射重组高致病性禽流感H5N1 (Re-1株) 灭活疫苗;4组肌肉注射重组高致病性禽流感H5N1 (Re-1株) 灭活疫苗，滴鼻和点眼新城疫弱毒疫苗(LaSota株) 各1羽份。

1.6 抗体效价检侧

每组分别在1免后7d、2免当日、2免后21d分别随机抽样采集50只鸡的血样品1ml (为了保证试验的真实效果，被采集过检测样品的试验鸡淘汰，不再混入剩余的试验鸡群中) ，送入实验室离心，提取血清进行血凝抑制试验 (HI) 。HI试验检测的抗体滴度大于或等于4 (log2) 时，判定为疫苗免疫合格;存栏鸡群免疫抗体合格率大于70%，判定为疫苗免疫有效，可在生产中应用。

2 结果

2.1 疫苗免疫反应的评价

免疫后，4个试验组均未出现异常表现，第2组与其它3组临床上也无差别。

2.2 抗体效价的评价

禽流感新城疫重组二联活疫苗 (rL-H5株) 按照北京市既定的免疫程序进行免疫，二免后其产生的抗体效价与重组高致病性禽流感H5N1 (Re-1株) 、新城疫弱毒疫苗(LaSota株) 单苗产生的抗体效价无明显差别 (详见表2) 。

3 讨论

(1)在对鸡群进行禽流感新城疫重组二联活疫苗 (rL-H5株) 免疫后，没有出现明显的不良疫苗免疫反应，即该疫苗在养禽生产中应用是安全可靠的。

(2)从试验的结果来看，使用禽流感新城疫重组二联活疫苗 (rL-H5株) 对蛋鸡进行免疫，在一免后20d进行抗体检测，禽流感抗体水平合格率接近农业部规定的70%合格率标准，且其抗体大都在合格临界值附近，须进行加强免疫后，鸡群的抗体才能达到保护水平。