乙肝两对半检查报告范文第1篇
1 乙肝两对半定性与定量方法
1.1 酶联免疫吸附试验 (ELISA)
ELISA作为传统检验乙肝两对半的定性方法, 因本身方法学的局限性, 易造成HBV的漏诊。ELISA是较早期开发使用的一种免疫性检测方法, 该法具有灵敏度高、特异性强的优点, 能满足一般的临床诊断、筛选的医疗要求, 且由于该技术操作简便快速, 适合于大批量的样本检验[1], 故ELISA法仍是目前我国各级医院的检验科用来预防、诊断、筛查乙肝的主要技术手段。
1.2 时间分辨荧光免疫分析技术 (TRFI A)
TRFIA是近10年发展起来的微量分析技术, 分析原理是使用三价稀土离子 (例如Eu3+) 作为示踪物, 通过标记多肽、蛋白质、抗体、激素、核酸探针、生物活性细胞, 反应体系发生相关反应之后, 采用时间分辨荧光分析仪来测定最终产物中的荧光强度, 再根据荧光强度与相对荧光强度的比值, 可判断反应体系中的被测物浓度, 以此完成定量分析。
1.3 ELI SA与TRFI A检测方法的比较
王晓红[2]的研究表明, TRFIA法和ELISA法对于样本的检测符合率可达91%以上, 且各指标的阴阳性结果经χ2检验, 差异无显著性, 两者均可满足对乙肝两对半5项指标的检测要求。ELISA用于预防性筛查乙肝, 可定性检测HBV, 而TRFIA技术灵敏度高、稳定性好、特异性高、动态范围宽, 用于乙肝患者临床诊断、观察疗效等方面, 可提供动态数据指导临床接种乙肝疫苗, 是理想的定量检测方法。“乙肝两对半”的检测结果意义在于反映机体感染HBV后免疫应答结果, “两对半”结果阳性反映的仅仅是感染了HBV, 而无关临床病情轻重程度。
2 试剂的影响
(1) 乙肝两对半试剂的生产厂家很多, 灵敏度及特异性都存在一定差别, 相关资料显示, 不同厂家生产试剂的特异性和灵敏度的范围为89.4%~99.3%、78%~89%, 数据显示存在很大的差异[3]。质量低劣的试剂对检验结果的影响较大, 极易出现假阳性、假阴性结果, 所以选择正规厂家的试剂非常重要。 (2) 不同方法学的检测试剂出现不同的两对半结果, 有时用ELISA法检验HBs Ag结果阴性而用电化学发光检验结果阳性, 是由于方法学灵敏度不同及使用单抗、多克隆抗体试剂的差异所致;由于单抗对亚型乙肝标志物、变异抗原的检测存在着差异, 故试剂厂家制备试剂时须考虑亚型、浓度。试剂对乙肝两对半的检验质量影响, 主要体现在灵敏性、特异性, 对ELISA的检验结果产生定性干扰, 而对TRFIA法主要是定量干扰, 故使用中应选用可靠正规厂家的试剂, 避免试剂造成的假阳性或假阴性检验结果。
3 标本的影响
标本的采集及处理可对ELISA的检验质量产生不同程度的影响: (1) 严重溶血的标本、混有红细胞的血清若残留在乙烯孔内, 都可能催化底物显色, 出现假阳性结果, 采血过程应规范, 避免标本溶血。 (2) 相关报道显示样品的存放时间直接影响结果的准确性, 室温下保存的血清标本HBs Ab从第5天、HBe Ag从第7天、HBs Ag从第9天开始就发生显著变化 (P<0.01) ;4~8℃下保存的血清标本HBs Ab从第7天、HBs Ag从第14天、HBe Ag从第14天开始发生显著变化 (P<0.01) , 于-80℃低温保存的血清标本HBV血清标记物可在4个月内稳定保存 (P>0.05) ;采集的样品及时进行检验, 可避免因存放过久而带来的检验误差。 (3) 标本的凝固不全, 在实际工作中, 若血压还未凝固即强行离心分离血清, 将导致血清中残留纤维蛋白原, 使用ELISA法检测会由于肉眼可见的纤维蛋白块而造成假阳性或假阴性结果。
4 操作因素的影响
乙肝两对半ELISA检验过程包括加样、加试剂、孵育、洗板、酶标仪、报结果等, 每一步骤都有可能人为造成检验结果偏差, 故对检验人员的操作技术要求极高。与ELISA相比较, TRFIA法的操作可避免人为因素造成的检验干扰, 随着TRFIA仪器及试剂国产化、检验费用的降低, 将利于TRFIA法的临床推广。
5 干扰物质
约40%的血清标本中含有非特异性干扰物质可影响检测结果, 包括类风湿因子、嗜异性抗体、医源性诱导的抗鼠Ig (s) 抗体、嗜靶抗原自身抗体等。干扰物质可能造成检测结果假阳性或假阴性, TRFIA法利用时间分辨荧光分析仪在激发后延迟测量时间, 可有效避免非特异性荧光的干扰, 以此提高检验的特异性。
乙肝两对半的检验质量影响因素还有许多方面, 包括仪器设备的功能及检修、药物的影响等, 实际检测乙肝两对半时, 应从多方面排除干扰因素, 避免出现假阳性和假阴性结果, 保证检验质量, 为临床提供正确可靠的检测结果。
摘要：探讨乙肝两对半检验质量的影响因素。采用ELISA作为传统检验乙肝两对半的定性方法, 对ELISA与TRFIA检测方法进行比较, 就包括试剂、标本、操作、干扰因素的影响进行分析。乙肝两对半的检验质量影响因素还包括使用仪器设备的功能以及检修、药物的影响等, 实际检测时应从多方面排除干扰因素, 避免出现假阳性和假阴性结果, 保证检验质量, 为临床提供正确可靠的检测结果。
关键词：乙型肝炎,血清标志物,检验质量
参考文献
[1] 叶应妩, 王毓, 申子瑜, 等.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社, 2006:11.
[2] 王晓红.乙肝两对半定性与定量检测的意义[J].中国民族民间医药, 2009 (18) :82.
