类风湿因子的意义范文第1篇
1 资料与方法
1.1 一般资料
本组选取2010年1月至2010年12月来我院检查的类风湿性关节炎患者137例, 男56例, 女81例, 年龄26～86岁, 平均56岁。对全部患者分别采用免疫散射比浊法 (以下称为检测组) 和乳胶凝集法 (以下称为对照组) 检测类风湿因子。
1.2 检查方法
1.2.1 免疫散射比浊法 (检测组)
免疫散射比浊法测定RF的基本原理为当包被有人g球蛋白/绵羊抗人g球蛋白的抗原抗体复合物的聚苯乙烯颗粒与含有类风湿因子的标本混合时, 这些颗粒会凝集起来。光线通过悬浊液发生了散射, 在散射比浊仪中造成的散射光强度取决于样本中类风湿因子的含量, 因此, 通过与已知浓度的标准品进行比较, 就可以确定某个样本中类风湿因子的含量。应用特定蛋白分析仪BNProSpec系统测定, 参考曲线的建立应用N类风湿标准品SL和N/T类风湿质控SL/1和SL/2中的类风湿因子的浓度可从相应的靶值表中得到, 结果为可比性国际单位IU/mL。
1.2.2 乳胶凝集法 (对照组)
(1) 将变性IgG包被于聚苯乙烯胶乳颗粒上, 这种致敏胶乳在与待测血清中的RF相遇时, 即发生肉眼可见的凝集, 此称胶乳凝集试验。 (2) 胶乳凝集试验操作:先在56℃30min钟灭活, (灭活C1q以阻止假阳性凝集) 。将待测血清用0.1moL/LPH8.2甘氨酸缓冲盐水作1∶20稀释 (生理盐水1mL中加血清0.05mL) ;然后取此稀释血清1滴 (约0.05mL) , 加于黑色方格玻片的方格内, 加乳胶RF试剂1滴, 立即摇动反应板3min, 使其充分混匀后, 于直射光下观察。每次试验均设阳性与阴性对照。 (3) 结果判断:如3min内出现显凝集者为阳性。阳性反应的标本应将血清进行倍比稀释测定滴度, 与阳性和阴性对照参比, 作出阳性或阴性的判断。
1.3 统计学方法
观察2组数据进行结果比较, 卡方检验, 应用SPSS11.0软件完成数据的统计处理。以P<0.05, 说明有显著差异, 有统计学意义。
2 结果
(1) 检测组:类风湿性关节炎患者137例, 检测出类风湿因子阳性133例, 检出率97.08%。
(2) 对照组:类风湿性关节炎患者137例, 检测出类风湿因子阳性96例, 检出率70.07%。
2 组数据比较, 卡方检验, P<0.05, 说明经统计学处理差异有显著性。
3 讨论
类风湿因子是一种抗变性IgG的自身抗体, 通常为IgM类, 多出现于类风湿关节炎患者血清或滑膜液。所属学科:免疫学 (一级学科) ;免疫病理、临床免疫 (二级学科) ;自身免疫病 (三级学科) [2]。类风湿因子是由于细菌、病毒等感染因子, 引起体内产生的以变性IgG为抗原的一种自身抗体。因为这种抗体首先发现于类风湿关节炎病人, 并在类风湿关节炎病人血清中滴度较高, 且持续时间较长所以被命名为类风湿因子[3]。其实, 凡是存在变性IgG, 并能产生抗变性IgG自身抗体的人, 在其血清或病变中均能测出类风湿因子说明类风湿因子并不是类风湿关节炎的特异性自身抗体。
类风湿因子是RA病程中一个早期的血清学标志并作为RA诊断标准之一, 本实验用免疫散射比浊法和乳胶凝集法2种方法检测RA患者的类风湿因子结果均有一部分患者未检出阳性, 这可能与RF的类型和隐性RF有关。从类风湿因子测定中得到的结果应该与临床和其他实验室发现结合在一起进行评价, 因为RF水平低并不必然说明不存在类风湿性关节炎, 而高的RF浓度也不仅限于出现在类风湿性疾病中;还需要对疾病存在情况进行进一步研究。通过比较笔者认为免疫散射比浊法检测RF结果作为类风湿性关节炎诊断价值较高。测定方法已自动化且较为简便, 测定系统国际标准化, 因而测定结果具有国际可比性, 并且敏感性优于乳胶凝集法, 试剂比较稳定, 自动化操作的特点减少了人为误差, 是目前检测RF较好的方法。
摘要：目的 探讨免疫散射比浊法和乳胶凝集法检测类风湿因子在类风湿性关节炎诊断中临床应用价值。方法 对同一组137例类风湿性关节炎患者, 分别采用免疫散射比浊法和乳胶凝集法检测的2组数据结果进行对照分析。结果 类风湿性关节炎患者137例, 检测组:检测出类风湿因子阳性133例, 检出率97.08%。对照组:检测出类风湿因子阳性96例, 检出率70.07%。免疫散射比浊法检出率明显优于乳胶凝集法, 经统计学处理差异有显著性 (P<0.05) 。结论 2种检测方法结果相关性良好, 免疫散射比浊法检测类风湿因子结果诊断价值较高, 敏感性优于乳胶凝集法, 值得临床推广。
关键词：类风湿因子,免疫散射比浊法,乳胶凝集法,类风湿性关节炎
参考文献
[1] 颜向军.2种测定类风湿因子方法的比较[J].南华大学学报, 2007, 35 (2) :216.
[2] 韩榜成.3项试验对类风湿关节炎临床诊断价值的探讨[J].检验医学与临床, 2008, 5 (6) :334.
类风湿因子的意义范文第2篇
1 资料与方法
1.1 一般资料
肺癌患者30例, 均为我院2006年12月至2010年6月收治的住院患者, 经胸片、胸CT、痰脱落细胞学、纤维支气管镜活检或胸腔积液脱落细胞学检查确诊, 无放化疗史, 剔除病理诊断不明确者、高血压病和糖尿病患者。其中男性25例, 女性5例, 年龄45～85岁, 平均 (60.7±9.4) 岁。组织学分型:鳞癌11例, 腺癌10例, 小细胞癌9例。按1997年国际抗癌联盟 (UICC) 非小细胞肺癌分期标准进行分期:Ⅱ期4例、Ⅲ期12例、Ⅳ期14例。肺部良性病变患者30例, 既往无心、肝、肾、肺等重要脏器疾病。家族中无肿瘤病史。其中男性24例, 女性6例, 年龄50～72岁, 平均 (59.2±8.5) 岁。肺炎16例、支气管扩张症8例、慢性支气管炎6例。2组患者在年龄、性别方面无统计学方面无统计学意义, 具有可比性, P>0.05。
1.2 方法
1.2.1 血清PDGF-BB浓度的测定
清晨取2组患者的空腹静脉血3mL, 在不加入抗凝剂的情况下迅速离心10min分离出血清, 置-70℃冷藏贮存待检。采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 法检测2组患者的血清PDGF-BB, PDGF-BB定量ELISA试剂盒购自上海森雄科技实业有限公司, 操作步骤严格按照说明书进行, 绘制标准曲线。
注:观察组与对照组相比, *P<0.05
1.2.2 免疫组织化学染色
免疫组织化学 (SABC法) 检测PDGF-BB链的表达水平。麦默通穿刺活检标本和术后切除标本经10%多聚甲醛固定后, 石蜡包埋, 制成4μm切片, 将固定切片置于60℃恒温箱中烘烤30min, 切片常规脱蜡水化, 3%双氧水即用型, 室温10min灭活内源性酶;柠檬酸缓冲液进行高温高压抗原修复, 山羊血清封闭非特异性抗原, 滴加一抗湿盒内4℃过夜, 依次滴加山羊抗兔IgG-HRP多聚体, 苏木素复染, 脱水、中性树胶封固。以用0.1mol/L PBS代替一抗作为阴性对照, 选已知阳性的切片作为阳性对照。兔抗人PDGF-BB抗体和SABC免疫组化试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司, 仪器为Elecys 2010全自动电化学发光免疫分析仪。
1.3 阳性结果判定方法
PDGF-BB的表达先在在X400倍视野下每张切片随机观察10个视野, 根据细胞染色程度评分:染色深度以多数细胞为准, 无着色为0, 浅着色为1, 深着色为2;再为切片中阳性着色范围评分:无着色为0, 着色<1/3为1, 着色>1/3为2, 弥漫着色为3, 最后将上述2项得分相加, 得分≥3为阳性。
1.4 统计学方法
用SPSS 11.0统计软件。记数资料采用均数±标准差表示, 组间计量资料采用t检验, P<0.05差异有统计学意义。
2 结果
观察组患者的血清PDGF-BB水平为 (378.56±34.26) pg/mL、PDGF-BB链阳性表达率分别为66.7% (20/30) , 均显著高于对照组, P<0.05, 见表1。
3 讨论
肺癌为肺部原发性恶性肿瘤, 是最常见的恶性肿瘤之一, 死亡率极高, 且其发病率和死亡率均呈上升趋势。早期肺癌不易早发现, 对该病如能做到早期发现、早期诊断、早期治疗, 预后效果很好[2]。PDGF主要由血小板、部分肿瘤细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞等产生, 与肿瘤血管生成、肿瘤转移密切相关。正常组织内PDGF的表达受到严格的调控。本研究结果表明肺癌患者血清和组织中的PDGF-BB的水平均显著高于肺部良性病变组, P<0.05。这说明PDGF-BB参与了肺癌血管的形成, 有利于形成有功能的新生血管系统, 从而间接促进了肿瘤的生长。其在肺癌组织中的高表达, 说明PDGF能够促进结缔组织间质细胞生长, 细胞分裂增殖, 诱导细胞产生V型胶原, 调节Ⅲ型及Ⅳ型胶原的合成, 其在加速肿瘤细胞增殖, 促进肿瘤的侵袭与转移。此外, PDGF抑制癌细胞凋亡和使5-Fu抗肿瘤敏感性降低, 并与其受体结合可提高细胞外机质 (ECM) 的降解[3]。综上所述, 随着肺癌发病率的不断上升, 只有不断提高肺癌的诊断水平才能尽量使患者得到有效的治疗。PDGF-BB在肺癌的发生发展中可能起着重要作用, 在肿瘤的诊断和预后判断中起作用, 其表达的检测有一定的临床指导意义。但具体作用机制有待进一步探讨。
摘要：目的 探讨血小板源性生长因子-BB (PDGF-BB) 在肺癌患者细胞中的表达和临床意义。方法 我院2006年12月至2010年6月收治的经病理证实的30例肺癌患者 (观察组) 及30例肺部良性病变患者 (对照组) 为研究对象, 采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 法检测2组患者的血清PDGF-BB, 免疫组织化学 (SABC法) 检测PDGF-BB链的表达水平。结果 观察组患者的血清PDGF-BB水平、PDGF-BB链阳性表达率分别为 (378.56±34.26) pg/mL、66.7% (20/30) 均显著高于对照组, P<0.05。结论 PDGF-BB在肺癌的发生发展中可能起着重要作用, 其表达的检测有一定的临床指导意义。
关键词：PDGF-BB,肺癌,表达,免疫组化
参考文献
[1] 黄竹英, 聂新民.血小板源性生长因子在肝细胞肝癌中的表达[J].现代医药卫生, 2007, 23 (21) :3167-3169.
[2] 秦建文, 周静敏, 马淑萍.非小细胞肺癌血清VEGF和PDGF测定的临床意义[J].天津医药, 2007, 35 (12) :897-899.
