《冬花》范文（精选5篇）
《冬花》 第1篇
1 实验测定过程
1.1 材料准备
本研究共采集四种不同性状的款冬花, 分别来自四个不同的产地。通过手工挑选的方式将四种不同性状款冬花的花蕾摘下, 按照紫色与黄色加以区分。
1.2 仪器和试剂
研究使用德国布鲁克公司制造的质子频率为600.13MHz的600兆核磁仪;所需试剂为3-三甲基硅基、氘代氢氧化钠、氘代丙酸钠、质量分数为99.8%的氘代氯仿、氘代甲醇以及NMR试剂重水。
1.3 样品制备
准确秤取200mg的款冬花样品粉末置于10mL的离心管内, 甲醇与蒸馏水各加入1.5mL, 然后加入3mL氯仿, 将其混合均匀。执行超声提取操作25min, 之后进行离心, 速度为3 500r/min, 时间在25min左右。离心之后, 提取液会分为上下两层, 然后将其转移到25mL的圆底烧瓶内进行减压, 使其浓缩蒸干。之后将其溶解于NMR试剂中, 下层的氯仿相使用800μL的CDCl3进行溶解, 上层的甲醇水相部分则使用400μL的氘代甲醇以及400μL的缓冲重水进行溶解, 溶解后再次进行离心, 10min以后取600μL上层清液放置于核磁管中待测。
1.4 测定过程
测定频率为仪器的额定频率600.13MHz, 谱宽为12345.679Hz, 傅里叶变换为0.188Hz, 共扫描64次, 脉冲的间隔时间为1s, 温度设定为25℃。采用手动方式进行基线和相的调节以及峰的校正。在核磁测定甲醇水相提取物的过程中, 采用noesyppr1d序列来压制水峰, 并使用氘代甲醇来锁场, 使用TSP作为内标。核磁测定氯仿相提取物的过程中, 采用的是zg30序列, 使用氘代氯仿来锁场, 内标使用的是TMS。
2 实验结果分析
2.1 实验数据处理
采用MestReNova对得到的核磁图谱进行处理, 在δ0.54~10.02分段内进行积分。而甲醇水相核磁图谱中的δ4.70~5.02段属于残余水峰, δ3.30~3.38属于残余甲醇峰, 因此不需要进行积分;氯仿相所得到的核磁图谱中, δ7.22~7.30属于残余氯仿峰, 也不需要积分。将积分得到的结果进行归一化处理, 然后利用SIMCA-P13.0软件来分析款冬花的主要化学成分, 并通过正交偏最小二乘法以及偏最小二乘法对成分进行判别分析。
2.2 实验数据分析
本次实验结果得到了款冬花的40多种代谢产物, 由于信息比较复杂, 因此决定采用多元统计分析方法来比较不同性状款冬花化学成分的不同, 步骤如下:
2.2.1 款冬花主成分的分析过程
对款冬花紫色与黄色花蕾的甲醇水相提取物进行PCA分析, 由主成分23.0%的PC1和20.3%的PC2所构建出的得分图显示, 紫色和黄色款冬花花蕾呈现分开的趋势, 并且组间差异较大, 表明两组花蕾的代谢情况存在明显差异, 主成分差异很大。通过氯仿相散点图我们可以知道, 两种不同性状款冬花非极性成分的差异也比较大。在PCA分析方法下得到的数据为最原始状态, 可以判定样品的组别关系和自然分布情况, 但可能会存在组内误差, 为进一步确定两种不同性状款冬花化学成分的不同, 本研究继续采用OPLS-DA和PLS-DA这两种方法来分析实验数据。
2.2.2 OPLS-DA分析
OPLS-DA分析法可以确定出紫色与黄色花蕾化学成分的差异, 因此在确定二者化学成分存在差异之后, 就可以采用OPLS-DA分析法将二者间的差异成分确定出来。通过对两种不同性状款冬花花蕾甲醇水相以及氯仿相进行OPLS-DA分析我们得到:紫色款冬花花蕾主要含有脯氨酸、马来酸、磷脂酰胆碱、苏氨酸、α-葡萄糖、醋酸、肌酐、3, 4-二咖啡酰奎尼酸、延胡索酸、4, 5-二咖啡酰奎尼酸、咖啡酸、芦丁、3, 5-二咖啡酰奎尼酸、对羟基苯甲酸、山柰酚类似物、腺嘌呤、芥子酸、款冬酮、甲酸、腺嘌呤核苷、16α-diol以及bauer-7-ene-3β等成分, 并且含量较高;而黄色花蕾的款冬花中则主要以琥珀酸、蔗糖、乙醇胺、柠檬酸以及脂肪酸类物质为主要成分。经t检验, 两种不同性状款冬花中的脯氨酸、醋酸、咖啡酸、3, 4-二咖啡酰奎尼酸、EMDNT、16α-diol以及bauer-7-ene-3β等成分存在明显差异性;而磷脂酰胆碱、肌酐、苏氨酸、马来酸、4, 5-二咖啡酰奎尼酸、芦丁、3, 5-二咖啡酰奎尼酸、腺嘌呤、山柰酚类似物、款冬酮以及腺嘌呤核苷等物质的差异则更加明显。
2.3 实验结果谈论
核磁仪的测定以及OPLS-DA分析证实, 紫色与黄色款冬花的主要化学成分差异较大, 尤其是磷脂酰胆碱、肌酐、苏氨酸、马来酸、4, 5-二咖啡酰奎尼酸、芦丁、3, 5-二咖啡酰奎尼酸、腺嘌呤、山柰酚类似物、款冬酮以及腺嘌呤核苷等物质, 差异非常明显。由于芦丁、3, 5-二咖啡酰奎尼酸以及款冬酮等成分具有较好的抗病毒、抗氧化以及镇痛作用, 而咖啡酸及绿原酸类则具有较好的抗病毒、抗菌以及抗肿瘤等效用, 款冬酮可以升压和兴奋作用, 因此可以通过间接或者协同方式发挥止咳化痰作用。也由此可知, 不同性状的款冬花由于主要成分不同, 因此药用价值也存在一定差异。
3 结语
综上所述, 不同性状款冬花的主要成分确实存在一定差异, 也因此决定了二者在药用价值上的差异。在临床用药中, 需要根据款冬花成分以及主要成分的作用来确定其用途。
参考文献
[1]任雪峰, 吴冬青, 林敏, 等.响应面法优化款冬花总鞣质提取工艺的研究[J].食品工业科技, 2012, 5 (8) :23-25.
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[4]陈雪园, 张如松, 杨苏蓓.款冬花化学成分及药理毒理研究进展[J].亚太传统医药, 2012, 6 (5) :98.
[5]赵鹏, 张丽华.款冬花多糖提取过程的动力学模型[J].中国医院药学杂志, 2012, 18 (1) :63.
款冬花治咳嗽两方 第2篇
在临床应用时，本品多与柴菀配伍，取款冬花之重在止咳，紫菀重在祛痰，两者合用，是化痰、止咳的最佳搭配。民谚云：紫菀、贝母、款冬花，专治咳嗽一把抓。乃为最好的写照。款冬花与麻黄、杏仁、苏子等合用，称“款冬定喘汤”，对治疗咳嗽、哮喘有良效。款冬花与杏仁、贝母、知母、五味子、桑白皮、甘草相配伍，称“款冬花汤”，可治暴咳之症。
款冬花与其他食物配伍治病的方法亦很多，现介绍两款：
1.冬花猪肺粥。取款冬花、麦门冬各15克，猪肺250克，大米100克。先将猪肺洗净，放水煮至七成熟，切丁，款冬花、麦门冬用纱布包好和大米、猪肺同放于砂罐内加水适量煮粥。粥好取出药包，加盐、葱、生姜少许调味，代早餐服食。适用于肺虚久咳、咯血、痰多之病症。
2.冬花银耳汤。取款冬花15克、银耳30克、雪梨1个、冰糖20克。将款冬花用纱布包好，梨去皮切片，与银耳、冰糖同置于砂锅内加水适量清炖，沸后10分钟取出药包，服食。适用于肺虚有热、肺燥咳嗽、痰中带血、咯血及老年性喘息之病症，宜常食。
款冬花化学成分及药理毒理研究进展 第3篇
关键词：款冬花,形态性状,化学成分,药理作用,安全性评价
款冬花系菊科款冬属植物款冬 (Tussilago farfaru L.) 的花蕾, 分布于我国河北、新疆等省区。款冬花性温, 味辛, 微苦, 润肺下气、止咳化痰, 主治喘咳痰多、劳嗽咯血、急慢性气管炎等症。本文对款冬花的形态性状、化学成分、药理活性及毒性研究情况进行综述。
1 形态性状
款冬的花先叶开放, 花亭数个, 有鳞片状苞叶10多片, 花雌性, 花期23月份[1]。药材性状:款冬的入药部位为其干燥花蕾, 呈不整齐棍棒状分布, 花头外面长有许多鱼鳞状苞片。药材气味清香, 味道微微发苦。药材市场上有掺入白矾、食盐、滑石粉的款冬花, 以次充好, 需要注意区分[2]。
2 化学成分
国内外现已报道款冬花的化学成分类型主要包括黄酮、萜类、酚类、生物碱类和挥发油类。
(1) 黄酮类。吴笛等[3]从款冬花95%乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇部分中分离得到槲皮素, 槲皮素-3-o-β-D-葡萄糖苷, 槲皮素4'-o-β-D-葡萄糖苷, 金丝桃苷, 芦丁等黄酮类化合物。
(2) 萜类。石巍等从款冬花中提取出两个新型倍半萜类结构, 为款冬花酮和新款冬花内酯。刘可越等[4]从款冬中提取得到14-aeetoxy-7, 8- (3-ethyl crotonoyloxy) –l-α- (2-methyl butyryloxy) –notonipetranon新成分, Santer等[5]自款冬花中分离得款冬二醇和山金车二醇。Yaoita等[6]自款冬花中分离得到款冬巴耳新醇, 巴耳三萜醇等。
(3) 酚类。刘可越等[4]从款冬花中提取分离得到一种新型酚性化合物1, 2-o-dicaffeoyl-cychopenta-3-ol, 吴笛等[3]从款冬花中分离得到酚酸及其衍生物, 有咖啡酸, 咖啡酸甲酯, 绿原酸等。
(4) 生物碱类。德国Luethy等测得中国产款冬花中含双稠吡咯啶生物碱肾形千里光碱 (senkirkin) , Rosberger等从北美产的款冬花中得到肾形千里光碱和千里光宁。
(5) 挥发油。款冬花中含丰富的挥发油成分, 如1, 3, 5-Cycloheptatrien[7]、石竹烯[8]等。
(6) 其他类。此外还含有尿嘧啶核苷, 腺嘌呤核苷, 蔗糖及胡萝卜苷等成分。
3 药理作用
3.1 对心血管系统的作用
王均默等[9]将款冬花醇提取液及煎剂对麻醉猫静脉注射后, 发现血压开始呈现短暂微降, 迅即呈急剧上升, 达到高峰后缓慢下降而维持一段时间的高血压状态。醚提取物升压作用较强, 对麻醉猫、兔、犬及大白鼠等静脉注射, 可见呼吸兴奋, 心率增快, 血压急剧升高。血管灌流实验及肾容积测定, 均显示对血管有收缩作用。
3.2 抗血小板活化因子的作用
血小板活化因子 (Platelet Activating Factor PAF) 是和炎症、气喘有关的一种脂类介质, PAF拮抗剂可用于治疗过敏性呼吸系统疾病、炎症等。韩秋佳等[10]研究发现, 款冬花素、甲基丁酸款冬花酯和14-去乙酰氧基-3, 14-去氢-2-甲基丁酸款冬花酯对血小板活化因子引起的血小板聚集有抑制作用。
3.3 抗氧化作用
刘彩红等[11]将款冬花黄酮提取液加入3种化学发光体系, 测量其发光强度, 根据系统化学发光被抑制的程度评价款冬花对活性氧的清除能力。结果显示款冬花黄酮对O2-、OH、H2O33种自由基有较好的清除能力, 且在0.38~47.65mg/L-1范围内呈现一定量效关系, 对3种自由基的清除能力大小:H2O3>O2->OH。
3.4 抗炎作用
款冬花乙醇提取物可以明显减少二甲苯致小鼠耳肿及角叉菜胶所致小鼠足跖肿;款冬花乙醇提取物能明显减少蓖麻油、番泻叶所致小鼠腹泻, 降低水浸应激溃疡、盐酸所致溃疡及吲哚美辛-乙醇所致溃疡[12]。
3.5 抗肿瘤作用
(1) 抗肺癌。肺癌是临床最常见的恶性肿瘤之一, 款冬花提取物1, 2-di- (3’, 4’-dihydroxyc innamoyl) -cychopenta-3-ol, 山奈酚和槲皮素对小鼠肺癌细胞LA795的增值均显示出一定的抑制作用, 其中槲皮素对肺癌细胞LA795的抑制作用最显著[13]。有文献表明, 槲皮素亦可抑制肺腺癌细胞A549细胞的增长, 并使其凋亡[14]。槲皮素对其他肿瘤也显示出较强的抑制作用[15]。
(2) 体外诱导人白血病K562细胞的凋亡。张秀昌等[16]将体外培养K562细胞经10, 30, 50, 70, 90mg/L的款冬花粗多糖作用48h后, 通过Hoeehst33258染色, 在荧光显微镜下进行形态学观察, 采用琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术检测细胞凋亡。结果发现K562细胞中出现核固缩凋亡小体, K562细胞DNA电泳均出现相差约200bp的梯子状条带, 流式细胞仪检测发现, 经不同质量浓度的款冬花粗多糖处理的K562细胞有凋亡峰。
3.6 止咳化痰作用
高慧琴等[17]采用氨水引咳法观察小鼠的咳嗽潜伏期和3min内咳嗽次数, 用气管段酚红法观察气管酚红排泌量, 结果款冬止嗽颗粒能明显延长浓氨水引咳后小鼠咳嗽的潜伏期, 减少咳嗽次数, 增加小鼠气管段酚红排泌量。
3.7 对眼及瞳孔的作用
对不麻醉的正常家兔和麻醉猫及兔, 注射款冬制剂后, 均引起瞬膜收缩, 瞳孔放大, 泪腺分泌。麻醉猫连续用5~6次后, 往往可见眼球向外突出, 瞳孔极度散大[18]。
4 安全性评价
款冬花中含有的肾形千里光碱 (senkirkin) 属于吡咯里西啶生物碱。该类生物碱可引起肝脏毒性。一些国家对含有此类生物碱的款冬花禁止使用, 导致款冬花的使用受限, 严重阻碍了推广和应用。张燕等[19]研究发现, 小鼠灌胃给予款冬花水提液、醇提液、总生物碱、非生物碱、克氏千里光碱及腹腔注射克氏千里光碱 (senkirkin) , 结果显示, 在所给剂量下, 水提液无肝脏毒性, 用药安全, 总生物碱、克氏千里光碱有明显的肝脏毒性。在多年临床应用中, 并未发现含有款冬花的复方有不良反应。据此可以推测, 复方除了水煎外, 配伍中还有可能存在药物间的相互作用而使其毒副作用降低。因此, 加强配伍研究对寻找减弱或抵消其毒性的方法具有积极的意义。还应加强在中成药制剂过程中不同提取方法及其工艺的研究, 积极寻找能降解、减少甚至消除其中senkirkin毒性的方法。
5 总结与展望
百合款冬花饮可治疗支气管哮喘 第4篇
在此方中，百合和款冬花都具有润肺止咳的功效。百合是人们经常食用的营养佳品。关于此药治疗支气管哮喘的效果，还有一段离奇的故事。据说在宋朝末年，有一群女人被强盗劫持，安放在孤岛上。当她们吃光所有食物后，只好在岛上到处采摘野菜充饥。不久后，她们就在该岛上挖出了一种长得像蒜瓣一样、呈乳白色、味道甘凉清润的东西。这些女人在长期食用这种东西后不仅没有饿死，其中有些人所患的咳嗽或支气管哮喘还被治愈了。这种神奇的东西就是百合花的块根，也叫百合。百合味甘，性寒，具有很强的敛阴润肺功效，适合有肺燥津伤或肺虚久咳症状的患者服用。款冬花味辛，性温，善降，专能理肺中之气，具有很好的润肺功效。將百合与款冬花配伍在一起，一润一降，可加强润肺止咳的功效。另外，百合的寒性可制约款冬花的温性，一寒一温相互为用，可发挥平缓的清润肺燥、止咳宁嗽的作用。
支气管哮喘是由于肺、脾、肾三脏的功能失调而引起的病症。百合款冬花饮中的款冬花和百合都是用来调理肺脏的，而大枣和枸杞子则具有调理脾肾的功效。大枣性温，味甘，有补脾胃、益气血的作用。早在2000多年前的《神农本草经》中，就有“大枣安中养脾”的记载。明朝的李时珍也说：“枣为脾之果，脾病宜食之。”对脾虚、气血不足的人来说，大枣是一种必备的补品。枸杞子性平，可入肾经，具有补肾滋肾的功效。用上述药物一起制成的百合款冬花饮可以同时调理肺、脾、肾三脏，是防治支气管哮喘的良药。
除了服用百合款冬花饮之外，支气管哮喘患者还可通过按揉膻中穴来进行治疗，以取得内外兼治的效果。膻中穴位于胸骨正中线上，两乳头之间中点的地方。此病患者可用食指或中指的指腹按揉膻中穴，每次按揉3～5分钟，每晚按揉一次。按揉此穴可取得调气降逆、清肺化痰的效果。
需要注意的是，病情较重的支气管哮喘患者应及时到医院就诊，以免延误了病情。
——摘编自吴大真 《花养女人幸福一生》
【作者简介】吴大真是主任医师、教授、研究生导师、中国药学会原秘书长、中国保健协会副理事长、中国保健养生协会会长、北京国际医药促进会副会长。她毕业于北京中医学院，师承中医泰斗秦伯未先生，在中医方面有很深的造诣，著有《临床医师诊疗技巧》、《中医肾脏病学》、《秦伯未医学名著全书》及《名中医绝技良方》等学术价值很高的专著。
《冬花》 第5篇
款冬花、紫菀药对疗效确切,但关于其止咳祛痰的现代药理学研究较少,大多停留于药效学验证阶段。为了探寻该药对配伍增效的物质基础和机理,本课题组前期研究中以止咳为药效指标,初步筛选了款冬花止咳有效部位及紫菀配伍(增效)部位[3]。在前期研究的基础上,以止咳为药效指标,对初步筛选出的款冬花有效部位和紫菀配伍部位进一步分段富集,得到了精制的款冬花有效部位和紫菀配伍增效部位。为了探讨款冬花、紫菀配伍对药效物质吸收和代谢的影响,本文以款冬花有效部位中的主要成分之一绿原酸为指标,考察和比较了款冬花与紫菀配伍前后绿原酸在大鼠体内的药动学过程,以期从配伍对体内过程影响的角度来诠释或部分诠释款冬花、紫菀配伍增效的机理。
1 材料与仪器
1.1 药材
款冬花、紫菀药材均购自河北安国药材市场,经中国药科大学生药学研究室张勉教授鉴定分别为菊科植物款冬Tussilago farfara L.的干燥花蕾及同科植物紫菀Aster tataricus L.f .的干燥根及根茎。
1.2 药品与试剂
绿原酸对照品(纯度为98%)、葛根素(内标,纯度为98%),均由南京郎泽植提有限公司提供;氨水(南京化学试剂有限公司,批号070430247);咳必清(金陵药业股份有限公司利民制药厂,批号060211);甲醇(江苏汉邦科技有限公司,色谱纯);甲酸(南京化学试剂有限公司,分析纯);乐百氏纯净水;其它试剂为分析纯。
1.3 仪器
岛津LC-2010A高效液相色谱仪;LC-Solution色谱数据工作站,万分之一天平(上海天平仪器厂);离心机(常州国华电器有限公司);高速冷冻离心机(Kendro,USA)
1.4 动物
昆明种小白鼠,雄性,体重(20±2)g(南京市江宁区青龙山动物繁殖场,合格证号:SCXK(苏)2003-0002)。SD大鼠,SPF级,雄性,体重(200±20)g(浙江省实验动物中心,合格证号:SCXK(浙)2008-0033。
2 方法
2.1 药物制备和动物实验方法
2.1.1 款冬花和紫菀各部位的制备
依据本课题组张巧真等[3]建立的方法制备款冬花90%醇沉部位(KDH)和紫菀90%醇溶部位(ZW)。将款冬花90%醇沉部位加水溶解后,加醋酸铅试液至不再生成沉淀,离心,倾出上清液,沉淀物水洗,水洗液与上清液合并;沉淀(悬于水中)和上清液分别用稀硫酸调至pH3,滤过,滤液分别于水浴蒸干,得到铅沉部位(KDH-1)和铅溶部位(KDH-2)。将紫菀90%醇溶部位加50%乙醇溶解后加醋酸铅试液同法处理,得到紫菀的铅沉部位(ZW-1)和铅溶部位(ZW-2)。各部位均配制为1mL含125mg生药量的水溶液;款冬花铅沉部位、紫菀铅溶部位和铅沉部位再分别配制为1mL含1.25 mg浸膏量的水溶液;各溶液均加吐温80混悬,备用。
2.1.2 小鼠氨水引咳实验
取雄性昆明种小白鼠称重后随机分组,每组10只。以蒸馏水(加吐温80)为空白对照、咳必清为阳性对照,各组均按0.2mL10g-1量连续灌胃给药3d。末次给药1h后,分别迅速向500mL宽口瓶内喷入等浓度等体积的浓氨水,密封,饱和2min后将单只小鼠迅速放入其中。观察从放入小鼠到其首次出现咳嗽的时间(潜伏期)及小鼠在2min内的咳嗽次数。实验数据采用t检验,P<0.05表示差异有统计学意义。
2.1.3 大鼠药代动力学实验
取雄性SD大鼠12只,禁食12h,不禁水,随机分为4组,灌胃给药,绿原酸组给予80mgkg-1单体,款冬花部位组、紫菀部位组各给予相当于2gkg-1生药量的浸膏(分别相当于绿原酸80,13mgkg-1),二者的配伍组按生药量(1∶1)给药。分别于给药前和给药后5,15,30,45,60,90,120,180,240,360,480min取血,肝素抗凝,3 000rpm离心15min,分离出0.2mL的血浆,按“2.2.2”项下方法处理后进样。
2.2 药代动力学实验方法
2.2.1 色谱条件 Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(250mm4.6mm,5μm);Alltech C18预柱(7.5mm4.6mm,5μm);柱温25℃;流速0.8mLmin-1;检测波长为324nm;进样10μL。流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸甲醇溶液(B),梯度洗脱:0～10min,15%～23%B;10～25min,23%～24%B;25～35min,24%～30%B。
2.2.2 样品处理 取血浆0.2mL,加30μL内标葛根素(浓度为20μgmL-1),加1molL-1盐酸20μL,涡旋30s,再加入甲醇550μL,涡旋3min;低温4℃,3 000rpm离心10min后12 000rpm离心10min,取上清液12 000rpm离心10min,取上清液进样。
2.2.3 方法学考察
(1)专属性比较空白血浆、对照品血浆、含药血浆的色谱行为,考察是否存在内源性干扰。
(2)血浆标准曲线制备绿原酸浓度分别为0.4,0.5,1,2,4μgmL-1的对照品血浆,按“2.2.2”项下方法处理后进样,记录绿原酸峰面积(As)和内标峰面积(Ai),以As/Ai为横坐标,绿原酸浓度为纵坐标进行线性回归。
(3)精密度实验配制含绿原酸分别为0.5,1,2μgmL-1质量浓度的血浆样品各5份,按“2.2.2”项下方法处理后,1d内测定5次,计算日内精密度;每天测定1次,连续测定5d,计算日间精密度。
(4)回收率实验配制含绿原酸分别为0.5,1,2μgmL-1质量浓度的血浆样品各3份,按“2.2.2”项下方法处理后进样,根据回归方程计算绿原酸浓度,与加样浓度比较,计算回收率。
2.2.4 数据处理 将所得的血药浓度-时间数据采用WinNonlin软件根据非房室模型法进行处理,计算药代动力学参数。
3 结果
3.1 款冬花有效部位与紫菀增效部位的确定
小鼠氨水引咳实验结果(表1)表明,以生药量计,与空白组相比,款冬花铅沉部位(KDH-1)止咳效果明显优于铅溶部位(KDH-2),也优于初级有效部位(KDH),因此确定铅沉部位(KDH-1)为款冬花止咳的有效部位,记为“款冬花部位”。紫菀与款冬花部位配伍实验结果(表2)表明,紫菀铅沉部位(ZW-1)与款冬花部位(KDH-1)配伍后,能明显延长咳嗽潜伏期,减少小鼠氨水引咳次数,其止咳效果优紫菀铅溶部位(ZW-2)与款冬花部位(KDH-1)的配伍,因此确定紫菀铅沉部位(ZW-1)为配伍增效部位,记为“紫菀部位”。
注:与空白对照组相比,*P<0.05,**P<0.01。
注:与空白对照组相比,*P<0.05,**P<0.01。
3.2 方法学考察结果
血浆中内源性物质不干扰绿原酸和内标物的测定(如图1所示);绿原酸在0.4～4μgmL-1范围内线性关系良好,血浆中绿原酸的回归方程为Y=0.774 2X+0.302 2(r=0.997 2);低、中、高3个浓度血浆样品绿原酸的回收率在92.72%～103.62%之间;日内精密度RSD<1.35%,日间精密度RSD<6.52%,符合生物样品药物浓度测定方法学要求[4]。
3.3 绿原酸在大鼠体内的血药浓度-时间曲线
大鼠灌胃给予绿原酸单体、款冬花部位、紫菀部位以及配伍部位后,绿原酸的平均血药浓度-时间曲线见图2。大鼠灌胃绿原酸单体后,60min达到血药浓度峰值,360min后血浆中检测不到绿原酸;灌胃款冬花部位、紫菀部位及部位配伍后,血浆中绿原酸的达峰时间(Tmax)均提前到15min,紫菀部位给药240min后血浆中检测不到绿原酸。另从图中可以看出血浆中绿原酸的药峰浓度(Cmax)的高低顺序依次为部位配伍> 款冬花部位 > 绿原酸 > 紫菀部位。
A. 空白;B. 空白+绿原酸+内标;C. 绿原酸组;D. 款冬花部位组;E. 紫菀部位组;F. 部位配伍组;1-绿原酸;2-葛根素。
3.4 绿原酸在大鼠体内的药动学参数
根据非房室模型,将各组给药大鼠不同时间的血药浓度数据采用WinNonlin软件进行处理,得到了绿原酸的主要药动学参数,结果见表3。与绿原酸单体组相比,款冬花部位组、配伍组的AUC0-t、AUMC0-t均大于绿原酸单体组,而配伍组又大于款冬花部位组;款冬花、紫菀部位组的t1/2、MRT均大于绿原酸单体组,而配伍组不仅小于2个单部位组,也小于绿原酸单体组;Cmax却是配伍组最大,约是款冬花部位的3倍,紫菀部位的7倍;Tmax的变化与上述药时曲线一致,非单体给药组Tmax均提前至15min。
4 讨论
对款冬花和紫菀2个部位的LC-MS成分分析中发现,两部位均含有较多的绿原酸和异绿原酸类成分。本实验在指标性成分选择时发现,当灌胃给予大鼠款冬花有效部位2gkg-1(生药量)时,血浆中能且仅能检测到绿原酸,故选择绿原酸作为指标性成分研究配伍前后绿原酸在大鼠血浆中的变化。
从实验结果可知,与绿原酸单体相比,款冬花部位组、紫菀部位组以及配伍组Tmax均从60min提前至15min,说明款冬花、紫菀及其配伍部位中,可能存在加速大鼠对绿原酸吸收的成分。款冬花部位组的AUC0-t、AUMC0-t、t1/2、MRT等参数均大于绿原酸单体组,推测款冬花中可能存在促进大鼠对绿原酸吸收,减慢其消除的成分。配伍组的AUC0-t、AUMC0-t、Cmax均大于款冬花部位组,表明款冬花和紫菀配伍进一步促进了绿原酸的吸收,推测配伍后可能形成了某些化学成分改变了细胞膜的通透性,或者抑制了转运蛋白而减少了外排分泌[5,6,7],也可能是两部位配伍后影响了血浆中游离药物的浓度或是血浆蛋白结合率。然而配伍组的t1/2、MRT与款冬花部位组相比明显缩短,说明两部位配伍后明显加快了绿原酸的消除,但是Tmax并未改变,Cmax较款冬花组增加约3倍,表明配伍并不影响绿原酸在大鼠体内的起效时间,但减少了绿原酸在体内的蓄积。“方证对应理论”可解释此种现象,即用于药动学实验的动物是健康的无病动物,而不是具有相应证候的动物,当给予这些动物药物后,“由于方不对证”,复方在体内呈现散乱无序的状态[8],可能会促使机体加速药物的清除。另有文献报道[9],绿原酸可能通过肾小管分泌排泄,而嘌呤的代谢物尿酸也是通过肾小管分泌排泄的,绿原酸的存在会减少尿酸的排泄从而诱发痛风。
已有的药理研究结果表明,异绿原酸类化合物,如二咖啡酰基奎尼酸,对平滑肌的抑制作用可以解除支气管平滑肌痉挛、缓解喘息症状,可用于治疗某些呼吸系统疾病[10]。异绿原酸类化合物可能是款冬花的药效成分,但其很容易水解为绿原酸,因此在血浆中只能检测到绿原酸而不易检测到原形成分。本研究结果表明,款冬花、紫菀配伍前后,指标性成分绿原酸的药动学参数,尤其是AUC、Cmax、t1/2和MRT发生了比较明显的变化。二者的配伍一方面促进了绿原酸的吸收(该现象可以解释为款冬花、紫菀“相须配伍”的增效机理之一);另一方面加快了绿原酸的消除,虽然减少了绿原酸在体内的蓄积,对生物体具有一定的好处,但却与配伍“增效”不太符合,其原因需要进一步深入研究。
摘要：目的:研究款冬花、紫菀配伍对绿原酸在大鼠体内药代动力学参数的影响。方法:在筛选款冬花止咳有效部位、紫菀止咳增效部位的基础上,将SD大鼠随机分成4组,分别灌胃给予绿原酸单体、款冬花部位、紫菀部位、款冬花部位+紫菀部位(即部位配伍),采用HPLC法测定血浆中的绿原酸浓度,并用WinNonlin药动学软件根据非房室模型法计算药动学参数。结果:大鼠灌胃绿原酸单体、款冬花部位、紫菀部位、部位配伍后的主要药动参数:AUC0-t分别为245.09±14.05,349.27±62.15,105.11±18.57,496.77±77.75μg.mL-1.min-1;t1/2分别为323.70±51.00,464.53±126.10,408.27±31.30,203.02±7.12min;Cmax分别为1.05±0.13,1.52±0.55,0.63±0.04,4.49±0.59μg.mL-1;Tmax分别为60.00±0.00,15.00±0.00,15.00±0.00,15.00±0.00min。结论:紫菀能促进大鼠对款冬花中绿原酸的吸收,加快绿原酸的消除,减少绿原酸在体内的蓄积,可以部分诠释款冬花、紫菀“相须配伍”增效的机理。
关键词：款冬花,紫菀,部位配伍,绿原酸,药代动力学
参考文献
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