大鼠行为学范文（精选7篇）
大鼠行为学 第1篇
1 资料与方法
1.1 实验动物
SPF级SD大鼠, 6~8周龄, 雄性, 体重180~200 g, 购自川北医学院实验动物中心。动物饲养环境安静, 有良好的通风和空气过滤系统, 室温22℃左右, 湿度50%左右, 明暗光照12 h:12 h, 自由摄食, 隔日更换笼具和垫料。动物适应环境3 d。雄性SD大鼠 (n=48只) 随机分为三组, 即正常对照组 (Naïve组:n=16, 分7、14 d亚组, 每亚组8只) 、假手术组 (Sham组:n=16, 分7、14 d亚组, 每亚组8只) 以及CCI组 (n=16, 分7、14 d亚组, 每亚组8只) 。
1.2 CCI模型的建立
(1) 按Bennet和Xie[1]方法制作CCI模型; (2) 称重:采用腹腔给药10%水合氯醛麻醉, 300~500 mg/kg。侧卧位, 手术侧在上, 消毒, 铺巾, 选择左后肢, 在股骨下方约l cm平行于股骨切开皮肤, 用小剥离子经股二头肌间隙钝性分离肌肉, 暴露坐骨神经, 用神经剥离子轻柔将坐骨神经与周围软组织分离; (3) 在坐骨神经分成三支前的主干部位游离神经7 mm左右, 在距神经起始处 (三支分叉处) 上方2 mm处, 用4.0含铬羊肠线结扎坐骨神经4道, 每道间隔约1 mm, 使被结扎的神经长约4~5 mm。注意结扎的松紧度, 以打结时可见肌肉轻微抽动为准; (4) 局部生理盐水冲洗, 间断缝合肌肉筋膜、皮下组织以及皮肤;术毕将大鼠放入鼠笼, 于温暖、安静环境自由喂养; (5) 假手术组除不结扎坐骨神经外, 其余同模型组;手术由同一人操作。
1.3 行为学观察
在手术后2周内, 每隔1~2 d观察1次, 包括大鼠的步态和左后肢的姿势、局部皮肤以及肌肉张力的改变程度、是否存在舔咬肢体现象等。
1.4 机械刺激伤害感受阈值 (MWT) 的测量
在安静的环境中, 将大鼠单独放置于透明的有机玻璃体中, 待大鼠适应环境15~30 min后, 以Electronic von Frey刺激针刺激大鼠左、右足底, 每只大鼠刺激3次, 间隔大于10 s。大鼠会出现抬足、缩足、快速甩足以及甩足后舔足等反应。将3次读数取平均值作为机械缩足反射阈值 (MWT) 。各组于术前、术后第1、3、6、8、10、13天进行测量。测量时间固定为9:00~13:00。术前测定值为基础机械痛阈。
1.5 统计学处理
采用PASW Statistics 18软件进行统计学处理, 计量资料以表示, 两组样本均数间的比较用t检验, 组间比较采用重复资料方差分析和post hoc检验, P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 大鼠行为学变化
CCI大鼠术后健康状况良好, 体重无明显减轻, 毛发富有光泽, 觅食饮水基本正常。术后1~2周, 手术足趾并拢轻度外翻, 下肢行走无力, 步态呈现跛行, 经常左后足悬空或不敢着地;站立时以右后肢持重, 左后肢抬起并紧贴于腹部;术后14 d左右, 左后肢出现比较明显的肌肉萎缩, 给予轻微von Frey刺激时, 大鼠经常迅速将左后肢抬起, 有时放入口中舔吮;CCI大鼠左后肢悬空时间常超过25 s, CCI大鼠无自噬肢体现象。
2.2 大鼠体重变化
CCI组大鼠术后健康状况良好, 体重无明显减轻, 但体重增长较Sham组和Naïve组略慢。各组大鼠术前基础值、术后第1、3天体重比较差异无统计学意义 (P>0.05) 。在术后第6、8、10、13天, CCI组大鼠体重与Naïve组、Sham组比较差异有统计学意义 (P<0.05) 。术前、术后Naïve组大鼠体重与Sham组比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 见表1。
*CCI组与Naïve组、Sham组比较, P<0.05
2.3 机械刺激伤害感受阈 (MWT) 变化
各组大鼠术前机械性痛阈比较差异无统计学意义 (P>0.05) 。手术前、后Naïve组大鼠痛阈与Sham组比较差异无统计学意义 (P>0.05) 。各组大鼠非术侧机械性痛阈比较差异无统计学意义 (P>0.05) 。CCI组大鼠术侧痛阈在手术后第3、6、8、10、13天明显低于非手术侧, 亦明显低于Sham组和Naïve组 (P<0.05) 。CCI组大鼠术侧痛阈在手术后第6天降低最明显, 此后一直保持此趋势至术后第13天, 见表2。
L:左足, R:右足, DX:*术后第X天CCI组与Naïve组、Sham组比较, P<0.05
3 讨论
神经病理性疼痛的研究大多来源于动物模型, 尽管目前模型还存在不少缺陷, 但是它为理解和探索人类神经病理性疼痛的发病机制提供了有用的工具。病理性疼痛按其病程可分为急性和慢性两大类。前者多由损伤或炎症反应所致, 当损伤痊愈或炎症消失时, 疼痛即可消除。后者则多由难以消除的慢性炎症或神经病变所致, 病程常迁延很久。慢性病理性疼痛模型主要分为两大类:炎症性及神经源性[1,2]。神经病理性疼痛的病理机制比较复杂, 病变部位可从外周感受器一直到脑。神经病理性疼痛一般均伴有血管功能异常及炎症征象[3]。急性神经病理性疼痛患者由于患肢交感缩血管神经节后纤维神经递质释放量下降, 引起表皮交感缩血管神经兴奋性功能丧失[4]。Bennett和xie于1988年首次复制出CCI模型, 是国际上应用较多的疼痛模型。该模型操作简单, 易掌握。该模型术后第2天开始出现痛反应, 10~14 d达高峰, 持续2个月后痛反应消失[1]。本次实验研究结果与上述理论相符。
CCI大鼠疼痛模型表现为自发痛 (自发抬起损伤肢体, 时而舔足、咬足或甩足, 避免损伤侧的负重) 、痛觉过敏 (机械痛敏和冷痛敏) 、轻度或中度的自残现象。多用于肿瘤压迫、重金属离子中毒、缺氧或代谢异常等诱发的神经病性慢性痛的研究[5]。由于铬肠线结扎之松紧度完全取决于实验操作, 不同的松紧度可能导致不同程度的神经纤维功能的丧失, 因此, 来自于受损坐骨神经向脊髓节段的传入冲动可能存在差异。CCI模型的机制主要是由于机械压迫使轴突损伤并引起异位放电, 并且用含铬肠线结扎坐骨神经后, 局部重金属铬对神经的化学作用使炎症介质释放。大约在术后2周, 神经损伤区域远端的有髓鞘纤维几乎全部脱髓鞘, 但无髓鞘C纤维保持完整, 损伤区域近端神经纤维正常[6]。
本研究还发现, CCI模型大鼠非手术侧 (右侧) 在术前、术后无显著变化, 说明未发生超敏反应, 无“镜像”痛发生。CCI大鼠行为学的改变及痛阈指标的变化有一定联系, 与经典文献报道相符, 说明模型建立成功, 为进一步的深入研究奠定了良好基础。
摘要：目的:探讨CCI (Chronic constrictive injury) 模型大鼠一般行为学及痛阈变化。方法:SD (Sprague-Dawley) 大鼠48只, 6～8周龄, 雄性, 体重180～200g。随机分为三组, 即正常对照组 (Nave组:n=16, 分7、14d亚组, 每亚组8只) 、假手术组 (Sham组, n=16, 分7、14d亚组, 每亚组8只) 以及CCI组 (n=16, 分7、14d亚组, 每亚组8只) 。按Bennet和Xie方法制作CCI模型, 通过von Frey测定大鼠神经结扎侧 (左侧) 及对侧 (右侧) 后足缩足反射阈值 (Mechanical withdrawal threshold, MWT) 。结果:与假手术组和正常对照组比较, CCI组大鼠术侧痛阈在术后第3、6、8、10、13天明显降低, 且低于术前基础值。结论:CCI大鼠行为学的改变与痛阈的变化有一定联系。
关键词：CCI模型,大鼠,疼痛行为学,痛阈
参考文献
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大鼠行为学 第2篇
1 神经反射功能
反射是神经系统功能活动的基本形式, 通过神经反射可初评出大脑功能的情况。常用的是Longa评分和Bederson评分。
Longa评分[1]:0分:无神经损伤症状:1分:不能完全伸展手术对侧前爪或后爪;2分:行走时, 向手术对侧转圈;3分:行走时, 向手术对侧倾倒;4分:不能自发行走, 意识丧失。
Bederson评分[2]:0分:无神经功能缺损;1分:悬空时前肢出现任何屈曲成分;2分:侧推抵抗力下降, 伴前肢屈曲, 无转圈行为;3分:同2分行为, 伴自由活动时向瘫痪侧划圈。
2 运动功能
运动是在神经系统控制下进行, 神经系统对运动的调节是复杂的反射活动。评价大鼠的运动功能反映脑损伤后其生存和恢复情况, 运动功能评测主要有:
前肢放置检测[3]:评价大鼠从胡须受到刺激后前肢的运动反应。将大鼠悬空, 使其与桌缘平行, 让胡须触到桌缘, 并保证前肢能触及桌边。大鼠每侧受测10次, 前肢触及桌角边缘次数的百分率即为该侧得分。可作为检查大鼠出血后较长时间康复治疗效果。
转棒上行走[4]:将大鼠放在转棒上观察:0分:转动过程中, 大鼠可在棒上行走;1分:转动过程中, 大鼠不会掉下来, 时间1min以上;2分:转动开始后大鼠从棒上掉下来;3分:转动开始前大鼠就从棒上掉下来。
其有着较为明显的自发性、经验性的特点, 缺乏系统的理论指导与完善的操作方法[9], 因此, 在治疗过程中, 医生不必拘泥于单一的心理治疗方式, 可将中医传统特色疗法和现代心理疗法相结合进行治疗, 优势互补, 以进一步提高不孕患者的生殖健康水平, 缩短治疗周期。但是, 这种结合治疗方式的效果需要更多的临床研究予以证明。
参考文献
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大鼠行为学 第3篇
1 材料与方法
1.1 材料
正常大鼠组Wistar大鼠60只, 雌雄各半, 平均体重 (300±50) g, 由中国科学院深圳先进技术研究院实验动物中心提供, 在实验室稳定条件下饲养1周后用Y型水迷路法粗筛, 凡15次测试中正确次数达15次的为合格。自闭症大鼠组来自于Jackson实验室, 是一种近交系大鼠, 该大鼠商品化出售, 是目前被广泛应用的自发自闭症动物模型供方为中国科学院深圳先进技术研究院实验动物中心。大鼠随机分为正常组、自闭症组、奥拉西坦组 (对照组) 、治疗组4组, 每组10只, 各组药均采用灌胃方法给药按20 g/ (kg·d) 给药, 奥拉西坦组按100 mg/ (kg·d) 给予奥拉西坦混悬液, 正常组均给予等容积的1 m L/ (100 g·d) 的生理盐水灌胃;连续28 d, 所有动物经处理至取脑前, 正常组、自闭症组、对照组、治疗组分别存活10、7、8、9只。
1.2 药物的制备
抗闭一号组方如下:该方由人参、熟地、山茱萸、石斛、麦冬、石菖蒲、远志、茯苓、肉苁蓉、姜黄、川芎、桃仁、红花等组成, 制成水煎剂, 每毫升含生药2 g储于4℃冰箱保存。奥拉西坦胶囊, 400 mg/粒 (由石药集团欧意药业有限公司制造) 加双蒸水配成10 mg/m L混悬液。
1.3 检测试剂与仪器
大鼠Morris水迷宫自动实验记录仪、大鼠程控穿梭箱供方同为中国科学院深圳先进技术研究院实验动物中心。
1.4 统计学方法
该研究数据采用统计软件SPSS 10.1进行分析, 所有结果以±s表示, 采用t检验和χ2检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 Morris水迷宫试验[2]
2.1.1 对大鼠定位航行试验潜伏期的影响
从潜伏期的影响可见, 两组大鼠训练前2天潜伏期速度下降, 从第3天开始趋于平稳, 基本维持在一恒定水平。为分析信息获取能力, 测量了5 d训练的总潜伏期和训练末3天的后潜伏期, 见表1。
2.1.2对大鼠定位航行试验和空间搜索试验学习记忆的影响
大鼠定位航行试验和空间搜索试验平台象限的游泳距离占总距离百分比, 池壁10%百分比、30%区域游泳距离百分比, (为方便分别称为象限百分比) , 见表2。
注:与正常组比较, aP<0.01;与模型组比较, bP<0.01;与对照组比较, cP<0.01
注:与正常组比较, aP<0.05, bP<0.01;与模型组比较, cP<0.05, dP<0.01;与对照组比较, eP<0.05, fP<0.01
2.1.3 对大鼠跨过原平台位置次数的影响
正常组、自闭症组、对照组、治疗组大鼠能依靠空间线索找到平台位置, 其运动轨迹最多位于原平台象限, 对照组较多地在原平台象限相邻的左右两侧象限寻找。但自闭症组大鼠基本围绕池壁游泳, 较少游向原平台附近, 其运动轨迹呈随机分布与各象限之中。无论从反映空间学习记忆获取能力的定向航行试验, 还是反映信息储存能力的空间搜索实验来看, 对照组、治疗组与自闭症组比较差异有统计学意义 (P<0.01) 。治疗组比对照组明显表现出更好的能力 (P<0.05) 。然而各项指标均未达到正常组水平。表明抗闭一号能使自闭症大鼠信息获取和储存能力部分恢复。
2.2 大鼠穿梭箱实验
2.2.1 主动回避反应率
在3 d前的训练中, 治疗各组被点击次数较少, 但主动回避反应率3组间未见显著差距, 从第4天开始, 自闭症组能基本维持原水平, 表现明显的行为障碍, 其他各组的主动回避反应率明显增加与自闭症组比较有显著性差异 (P<0.01) , 但仍未达到正常组水平, 到第5天正式测试结果与上述一致, 只是差距更加明显。
2.2.2 被动逃避时间
从第4天开始, 正常组、对照组、治疗组的被动逃避时间比自闭症组明显缩短 (P<0.01) , 第5天继续缩短 (P<0.01) 。自闭症组继续保持较长的被动逃离时间。各组结果与主动回避反应率相一致。
3 讨论
抗闭一号对自闭症大鼠的行为能力有一定的提高作用可能有以下三方面作用:第一方面双向调控祖细胞的转移, 自闭症患儿在18个月前脑组织发育异常出现了脑组织细胞的异常转移, 这种转移与肿瘤细胞的转移有类似之处, 活血化瘀中药在肿瘤治疗中有逆转肿瘤细胞转移的趋势, 并且发现活血化瘀药在肿瘤治疗领域有抑制和促进肿瘤转移的双向作用[3], 该药方的一个君药为人参, 其中的人参皂苷RE在细胞水平上对细胞膜的流动性有双向调节的作用[4], 因为一个细胞的活动与细胞膜的流动性呈正相关, 也就是说大脑中的祖细胞在脑组织迁移过程中有长距离迁移不足, 短距离迁移过多的现象, 而人参对肿瘤细胞有双向调节作用, 该方在实验中是否能影响祖细胞的变异性迁移值得研究。第二方面在调节新生血管研究上, 一个细胞转移后增生扩大与新生血管有关, 血管生成是一个非常复杂是的生理过程受一系列血管生成因子和抑制因子的精密调控, 目前已证实益气活血化瘀法有抑制和调节新生血管的作用[3], 益气药人参中的Rg3对血管的形成有明显的抑制作用, 表明益气和活血药配伍有增效作用。第三方面调控脑神经递质, 自闭症在神经递质方面表现为脑细胞突触间隙乙酰胆碱的含量下降, 而周围血液中五羟色胺的增高。地黄引子是抗闭一号方的主要成分, 近年来不少学者对该方进行了研究, 总结有四大作用, 可显著改善AD模型大鼠的学习记忆障碍, 其中能明显提高CHAT的表达, 减轻胆碱能系统的损害, 这一点同样适用于自闭症的大鼠;可抑制MAO活性从而提高AD模型大鼠的学习能力;能抗氧化发挥抗AD作用;可抑制凋亡相关基因ICE基因的表达[5,6], 这些作用为抗闭1号的有效作用机制与自闭症的治疗方法密切相关, 为自闭症研究提供了方向。
参考文献
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大鼠行为学 第4篇
关键词：SD大鼠,Wistar大鼠,跳台反射
跳台反射法是国内外大鼠耳鸣实验研究中最近几年较常用的方法[1,2],国内一般选用雄性Wistar大鼠作为实验动物,国外选用的实验动物为雌性Long-Evans大鼠[1]。Wi star大鼠是美国费城Wi star研究所动物室培育建立的最老的一种纯系白色大鼠,该品种头部较宽,耳朵比其他品系的稍长。SD大鼠由美国Sprague-Dawley农场用Wistar大鼠培育而成[3]。SD大鼠与Wistar大鼠同属于封闭群,而且因为SD大鼠与Wistar大鼠是比较常用的品系,在国内易得。我们于2009年7月至9月在江苏省中医院药理室进行实验,主要将SD大鼠与Wi star大鼠在跳台反射法中的不同反应作一比较,为建立跳台反射法耳鸣动物行为学模型前动物的筛选提供一种实验依据。
1材料与方法
1.1动物
健康雄性白色Wistar大鼠20只,健康雄性白色SD大鼠20只,由河南省实验动物中心提供,合格证号:SCXK (豫)2005-0001。所有动物耳道清洁,耳廓反射灵敏,对电刺激反应敏感,体重230g～380g。
1.2主要仪器
专用屏蔽训练室(自制);大鼠跳台仪(北京药物研究所,DTT-2型);飞乐牌扬声器(YD-2502型,8Ω);计算机控制系统。
1.3方法
1.3.1动物分组
将20只SD大鼠分为一组为SD大鼠组,将20只Wistar大鼠分为一组为Wistar大鼠组。
1.3.2跳台反射训练
将大鼠置于隔音室内适应性分笼喂养,每笼5只。室内温度恒定控制在25℃,人工控制照明12小时灯光开/关使动物的昼夜节律保持稳定,饮食及饮水充足,一直到实验结束。条件反射训练于另一隔音室内进行,各频率背景噪声均<25dBSPL,每只大鼠均单独进行训练。训练时将大鼠置于跳台仪内,箱顶扬声器给予10kHz,70dBSPL的白噪声作为条件刺激,持续时间为20秒,非条件刺激为大鼠足底电击(50v),持续时间至多17秒(与声刺激同步进行),条件刺激和非条件刺激出现的时间间隔为3秒。训练大鼠当听到声刺激信号后,因足底受到电击而产生向箱内绝缘跳台跳跃的逃避反应。每只大鼠每天连续训练10次,每次训练的间隔期为3分钟。训练持续三周。每次记录大鼠在给声期间及刺激间期的行为反应情况。动物行为观测指标为:①正确反应率,为外界给声不给电时动物正确跳上跳台的百分率;②假阳性反应,为外界不给声也不给电时动物跳上跳台的反应。
1.3统计学分析
所有实验数据均经SPSS 11.5统计软件处理,对实验结果进行卡方检验。
2结果
跳台反射训练一共持续三周,每只大鼠总计训练次数为210次,结果SD大鼠的假阳性反应率为(4.31±6.99)%,正确反应率为(14.40±19.12)%,Wistar大鼠的假阳性反应率为(2.98±4.34)%,正确反应率为(15.36±17.74)%。经卡方检验统计,χ2=1.504,P=0.22,得出SD大鼠的正确反应率与Wistar大鼠相比无显著性差异(P>0.05)。SD大鼠与Wistar大鼠从训练开始,每天的反应情况见图1,2。
3讨论
(1)本实验根据Guitton[1]的跳台法耳鸣动物模型,并加以适当地进行了如下改进:①针对文献报道中条件刺激结束1秒后给予30秒的非条件刺激的方式,考虑到耳鸣为持续性信号的特点,我们将条件声刺激增加为20秒,以使外界声信号与耳鸣的存在形式更为相似。非条件刺激持续时间至多17秒,与声刺激同步进行,使动物在接受电击的同时始终有声刺激的存在;②文献要求在条件刺激结束1秒后给予非条件刺激,但我们在条件反射训练过程中发现动物较难在1秒内对声音作出正确反应,因此我们将条件刺激和非条件刺激出现的时间间隔设为3秒,取得良好的效果。另外,Guitton[1]将动物至少在连续3个训练系列(即连续30次条件反射训练)中对声音的正确反应率均≥80%判定为条件反射建立成功。国内有文献报道20只Wistar大鼠在条件反射中连续30次达到80%正确反应率的有15只即有75%的大鼠能进入造模阶段[2],本实验20只Wistar大鼠符合连续30次达到80%正确反应率的只有1只,与文献报道的有明显的差异,其余的Wistar大鼠平均正确反应率也只有15.4%,如果将假阳性反应也计入其中,总的正确反应率也只有18.3%。因此把动物至少在连续3个训练系列中对声音的正确反应率均≥80%作为条件反射建立成功的前提是值得探讨的。这也需要我们通过重复性的实验来验证正确反应率的高低,如果通过反复证实确认正确反应率很低的话,在造模之前就要选用大批的动物进行条件反射训练,这样才能满足正式实验所需的动物数量。
(2)本实验是建立跳台反射法耳鸣动物行为学模型前所需要做的动物筛选的过程,只有成功建立了跳台反射才能被选择成为造耳鸣动物模型的动物,否则即被淘汰[4]。国内使用这种实验方法的几乎都是选用Wistar大鼠用于实验,但是在本实验中我们发现SD大鼠和Wistar大鼠的正确反应率无显著性差异(P>0.05)。SD大鼠和Wistar大鼠同属于封闭群,特征上看,Wistar大鼠比SD大鼠的头部宽,耳朵长,但是从实验结果看,耳朵较长在实验过程中并没有决定性的影响到实验结果。所以,总体来说,SD大鼠与Wistar大鼠在跳台反射法实验中的正确反应情况基本是相似的。但是,从假阳性反应率看,Wistar大鼠在10天内几乎没有假阳性反应,10天后才逐渐的形成,但是SD大鼠从第四天开始就有假阳性的出现,对于整个造模实验来说,在训练阶段假阳性的出现会干扰实验结果,是一个不利的因素。从这点来说,Wistar大鼠比SD大鼠的干扰因素相对较少。
(3)在实验过程中,我们还发现无论Wistar大鼠还是SD大鼠在跳台反射训练中对电刺激的敏感性波动较大,从图1和图2可以明显看出。而且每只同种大鼠之间差异也很大,有些大鼠的正确反应率是随训练的强化慢慢增加并且稳定的,但是有些大鼠的正确反应率基本为零,还有些是开始正确反应率很高但是后来逐渐降低,这也许与动物空间学习记忆能力有关,国内有学者证实多因素的21天慢性应激(束缚、电击足部、噪声)可使动物空间学习记忆能力明显下降[5],所以随着学习记忆下降后就忘记了绝缘跳台是安全的,正确反应率随即也就降低了。总的来说,跳台反射法中影响动物的正确反应因素较多,这种方法的改进空间还比较大,在以后的研究中,需要结合自身的实验条件和环境不断地完善。
参考文献
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大鼠行为学 第5篇
关键词：高压氧治疗,脑外伤,cAMP应答元件结合蛋白 (CREB) ,NSS评分,大鼠
颅脑外伤 (traumatic brain injury, TBI) 是指暴力直接或间接作用于头部造成的颅脑外伤或颅内血肿, 临床上死亡率及致残率高, 预防和减少继发性脑损伤是促进患者存活, 改善患者预后的关键。脑外伤临床治疗手段有限, 高压氧治疗 (hyperbaric oxygen treatment, HBOT) 是临床上一种有效的能促进TBI修复的非创伤性康复疗法。本研究探讨了HBOT对急性颅脑外伤大鼠神经功能修复的影响及其对信号分子c AMP应答元件结合蛋白 (c AMP response element blinding protein, CREB) 基因表达的调节, 为HBO治疗颅脑外伤的临床应用提供分子依据。
1材料与方法
1.1实验动物与分组清洁级雄性SD大鼠24只, 体重 (220±20) g, 购自昆明医科大学动物实验中心。按随机数字表法分为假手术组、脑外伤组及高压氧治疗组, 每组8只。假手术组, 只切开头皮和凿开颅骨;脑外伤组, 切开头皮和凿开颅骨后, 用重物自由落体冲击脑组织造成中度脑挫伤;高压氧治疗组, 脑中度撞击伤并给予高压氧治疗一疗程。
1.2方法
1.2.1动物模型制备参照Feeney等[1]文献介绍的方法制备大鼠中度颅脑损伤模型:用1%水合氯醛 (1 m L/100 g) 行腹腔注射麻醉, 俯卧位固定大鼠。常规消毒铺巾, 在头部距前囟5 mm处冠状切开皮肤成“U”型切口, 将头皮向尾侧翻开。分离骨膜, 暴露右侧顶骨, 于矢状缝旁2.5 mm, 冠状缝后1.5 mm钻一骨孔, 咬除颅骨至骨窗直径为5.0 mm×5.0 mm, 显露硬脑膜, 以50 g重的铁质圆柱体自30 cm高处沿铁杆自由落体撞击垫片, 造成右侧大脑运动皮质区挫裂伤。然后缝合皮肤, 常规喂养, 并给予抗生素治疗。
1.2.2高压氧治疗高压氧治疗组在脑外伤后1 h即行高压氧治疗, 治疗10 d, 1次/d。加压舱为上海七〇五所生产的SHC900Ⅱ型单人透明氧气加压舱。大鼠进舱后直接加压供氧。先升压15~20 min, 然后稳压25~30 min, 最后减压20 min。吸氧浓度91%~99%, 治疗期间压力维持在0.18 MPa。
1.2.3神经功能缺损 (neurological severity scores, NSS) 评分于高压氧治疗一疗程后 (即伤后第10天) 采用双盲法, 参照Chen等[2]报道的NSS评分表, 对各组大鼠进行神经功能缺损评分。得分越高, 则大鼠神经功能缺损越严重。
1.2.4样本获取高压氧治疗一疗程后, 完成NSS评分, 将大鼠处死, 获取右侧大脑运动皮质, 进行后续的逆转录聚合酶链式反应检测。
1.2.5逆转录聚合酶链式反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction, RT-PCR) 利用Primer Premier 5.0软件设计目的基因CREB和内参β-actin的引物序列, 并送生物公司 (Invitrogen, USA) 合成。以下为目的基因的引物序列、退火温度、产物长度。CREB, 上游引物5’-CAGATTGCCACATTAGCCC-3’, 下游引物5’-TTCCCTGTTCTTCATTAGACG-3’, 退火温度49.5℃, 产物长度792 bp;β-actin, 上游引物5’-GTAAAGACCTCTATGCCAACA-3’, 下游引物5’-GTGAGCACTGAAGCGAAAGC-3’, 退火温度52.5℃, 产物长度227 bp。使用Trizol试剂盒 (Invitrogen, USA) 提取三组样品的总RNA, 用分光光度计测量样本纯度和浓度;逆转录c DNA的制备, 按照PCR Master Mix Kit (Thermo, USA) 说明书操作进行PCR扩增, 反应体系总体积为25μL。反应条件为:94℃预变性3 min, 94℃变性45 s, 各因子退火温度退火45 s, 72℃延伸1 min, 35个循环后72℃延伸5 min。PCR产物于1%琼脂糖凝胶电泳检测分析, 分别计算CREB的PCR产物与β-actin的PCR产物间光密度比值。
1.3统计学处理所有数据均用SPSS 22.0软件进行统计学分析, 采用单因素方差分析进行统计学检验, 计量资料以表示, 以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1各组大鼠NSS评分结果比较大鼠急性脑外伤后, 大部分动物损伤当天即发生抽搐, 随后出现瘫痪不能正常行走, 四肢与躯干失去平衡功能, 容易在平衡木上跌落。术后第10天NSS评分结果显示:与假手术组得分 (0.30±0.10) 分比较, 脑外伤组NSS评分 (4.50±0.40) 分明显升高, 差异有统计学意义 (P<0.01) , 而高压氧治疗组NSS评分 (3.10±0.35) 分, 较脑外伤组明显降低, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 见图1。NSS评分结果说明脑外伤后大鼠神经功能明显受损, 而高压氧治疗促进了脑神经功能修复, 提高了大鼠神经行为学功能。
*与假手术组比较, P<0.01;#与脑外伤组比较, P<0.05
2.2各组大鼠CREB m RNA的表达变化RT-PCR结果显示:三组大鼠大脑皮层样本中均能检测到信号分子CREB m RNA的表达。结合β-actin内参, 对三组CREB m RNA扩增产物条带进行光密度值检测, 结果显示:脑外伤组CREB m RNA为 (0.81±0.02) , 与假手术组的 (0.62±0.01) 比较, 表达水平明显升高, 差异有统计学意义 (P<0.01) ;高压氧治疗组CREB m RNA为 (0.72±0.02) , 与脑外伤组比较, 表达水平明显降低, 差异有统计学意义 (P<0.01) 。RT-PCR结果表明急性脑外伤后, 损伤的运动皮质区CREB m RNA的表达明显升高, 而高压氧治疗抑制了皮质区CREB基因的表达, 说明高压氧治疗改善大鼠神经功能可能与抑制损伤皮质区CREB信号分子的表达有关。具体见图2。
注:各组CREB m RNA扩增产物条带图, β-actin为内参基因 (图A) ;各组CREB扩增产物条带定量图, *与假手术组比较, P<0.01;#与脑外伤组比较, P<0.01 (图B)
3讨论
颅脑外伤 (TBI) 是临床上常见的神经外科急危重症, 其致死率及致残率高, 临床治疗方法少, 疗效差。TBI一旦发生, 常常导致神经元变性坏死, 神经突起断裂, 细胞凋亡等原发及继发性损伤, 最终致残, 影响生活质量。高压氧治疗能通过减轻颅脑外伤缺氧后宿主脑水肿, 减少内源性神经元变性、凋亡与坏死, 提高生长因子的生物活性等来发挥治疗作用[3]。本研究发现, 大鼠急性脑外伤后, 大部分动物损伤当天即发生抽搐, 随后出现瘫痪不能正常行走, 四肢与躯干失去平衡功能, 容易在平衡木上跌落, NSS评分表现是TBI组较假手术组明显升高, 而高压氧治疗10 d后NSS评分明显降低, 说明高压氧治疗能明显改善脑外伤大鼠神经功能, 提高大鼠神经行为学。实验结果进一步验证了高压氧对TBI的具有明显治疗效果[4]。关于其作用机制可能为: (1) 改善脑血流及脑细胞供氧。脑损伤后, 神经组织缺血缺氧, 脑细胞功能得不到足够的能量保障, 脑细胞将发生一系列继发性损伤。高压氧治疗通过改善脑血流及增加血液中物理溶解的氧, 改善氧供、促进组织氧代谢, 减少氧自由基的产生, 从而促进脑细胞的修复[5,6]。 (2) 降低颅内压, 减轻脑水肿。脑水肿在脑外伤病理生理改变中具有普遍性。脑水肿的发生是由于血脑屏障的破坏, 脑微循环障碍, 脑细胞代谢障碍及自由基损伤。颅脑损伤亦可因脑出血形成颅内血肿, 组织渗出明显, 导致颅内压升高。高压氧治疗可以通过提高血氧分压, 收缩血管, 减少脑血流量, 从而减轻脑水肿, 使颅内压下降, 促进脑细胞修复[7]。 (3) 通过轴索发生新的侧枝, 建立新的突触联系, 使神经功能得到恢复; (4) 神经保护作用。高压氧治疗可以通过分泌神经营养因子、抗炎因子 (如IL-10等) 、抑制小胶质细胞激活及促炎因子的产生 (如TNF-ɑ等) 等方式, 阻碍炎症瀑布的发生及细胞凋亡等, 促进受损的神经细胞修复, 发挥神经保护作用[3,8,9,10]。
高压氧在脑外伤治疗中的研究和应用取得了很大的成绩, 但高压氧治疗颅脑外伤的分子信号机制尚不清楚。本实验调查了高压氧治疗脑外伤大鼠损伤运动皮质区的c AMP反应元件结合蛋白 (CREB) 信号分子的表达。实验发现, 脑外伤后损伤运动皮质区CREB m RNA的表达明显上调, 而高压氧治疗下调了运动皮质区CREB的表达。CREB是转录因子b ZIP蛋白家族中CREB/ATF亚家族的一员, 能够选择特异性结合c AMP反应元件 (CRE) , 发挥生物学效应。CREB由341个氨基酸残基组成, 分子量约为43 KD, 其分子结构分两个区域, N-端区域和C-端区域, N-端区域主要与调节转录的功能有关, C-端区域主要是与启动子结合的部位。CREB分子是多种蛋白激酶作用的底物, 其转录活性受多种信号转导通路的调控, 主要是c AMP通道、钙离子通道的调节、蛋白激酶A、Ras/MAPK以及RSKp90等[11]。研究表明:在脑外伤中, 活化 (磷酸化) 的CREB可直接或间接激活相关基因转录, 进而表达某些蛋白分子 (如c-Fos、Jun-B、bcl-2等) 和神经营养因子来发挥作用[12]。最新研究发现, 在中枢神经系统损伤中, 缺氧导致的神经细胞凋亡是由于CREB信号的激活所致[13]。此外也有文献报道, 持续的CREB的激活在脑外伤中介导了神经元的凋亡, 抑制了神经组织的修复[14]。大量研究认为, CREB信号是神经炎症反应中神经胶质细胞激活的重要通路, 可诱发炎症因子的大量释放引起的炎症瀑布式反应, 最终导致神经细胞凋亡[15], 而研究表明高压氧治疗可以抑制脑外伤后的神经炎症风暴及小胶质细胞激活所致的受损细胞的凋亡[9,10]。因此, 本实验发现TBI术后CREB表达明显上调, 可能由于损伤缺氧导致CREB的激活促进损伤皮质区神经元的凋亡, 而高压氧治疗明显下调了CREB信号分子的表达, 并且在神经行为学上得到明显的改善, 结合文献报道, 高压氧治疗可能是通过抑制CREB信号的激活, 减少了胶质细胞及炎症因子的产生, 阻碍了炎症瀑布式反应导致的细胞损伤, 最终减少细胞凋亡, 改善了神经功能, 提高了TBI术后大鼠的神经行为学。
大鼠行为学 第6篇
关键词：帕金森病,旋转行为检测,图像捕捉卡,视频跟踪技术
帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种以静止性震颤、肌强直、运动减少及姿势步态异常等为主要临床表现的慢性退行性神经系统疾病,多发于中老年人。目前其治疗主要有手术治疗、基因治疗及药物治疗等,但都不是最理想的治疗手段,为了探索更有效的治疗方法,国内外研究者利用实验动物不断进行大量的科学研究,研究过程中必须检测大鼠的旋转行为,大部分研究人员采用目测法。McCoy MK等人[1]将大鼠放进直径为24.5cm的玻璃圆筒进行检测;Putterman DB等人[2]将大鼠放入利用聚碳酸酯材料做的透明盒子(面积28 cm2,高19 cm)进行观察;国内有些研究人员[3]是直接将实验鼠放入圆锅内,直接人工记录实验鼠的旋转次数。也有报道Chopin P等人[4]将实验大鼠放置于圆柱状的笼子(直径240mm,高300mm)里,利用自动流量计进行记录;有些则采用大鼠旋转记录仪进行记录,这种仪器是将实验鼠固定于鼠套内,随着实验鼠在光滑的半圆形锅内旋转,带动轴承及相连的带孔圆锅转动,发光真空管的光束只有透过圆锅上的圆孔方能照到光转换器上去,经放大处理后输出到记录仪上定时打印出来,并能表示转动方向[5];另有研究者采用自制的记录仪进行检测[6,7]。上述各种检测手段,无论是目测法还是传统的旋转记录仪均存在很多缺点,其操作起来都比较麻烦、机械,而且很大程度上也影响实验结果的准确性,对于从事帕金森病研究的科研人员不是最理想的检测手段。我们研制的这种装置,克服了传统检测手段的很多缺点,将硬件和软件有机结合,利用视频摄像跟踪技术,使实验过程自动化,减少了实验误差,使结果准确可靠,操作简便,较好地满足了科研工作者的需要[8]。
1 装置的结构与制作
本装置由硬件和软件两部分组成。
硬件部分主要包括锅型实验平台一个、摄像头一个、6米视频信号电缆一根、计算机一台、图像捕捉卡一块、摄像头固定支架一副、加密狗一只。具体安装如下(见图1):将圆锅3锅面向上固定在支架2上;将摄像头1正对圆锅3固定在支架2上,保证摄像头1的摄像范围能包含圆锅3;将图像捕捉卡和加密狗安装在计算机上,将摄像头1通过视频信号电缆与图像捕捉卡连接。支架2为长方形框架;在支架2下边框正上方设置一个四脚的圆锅固定架5;在支架2下边框正下方设置一个四脚的支架固定架6。圆锅固定架5的四个脚各设置一个橡胶垫4;支架固定架6的四个脚各设置一个脚垫7。
本装置中用到的摄像头1、圆锅3、橡胶垫4、脚垫7、图像捕捉卡、视频信号电缆、计算机均可购买使用以现有技术制成的成品;支架2可由不锈钢方管或其他材料焊接成长方形框架;圆锅固定架5可由不锈钢方管或其他材料焊接成能承托圆锅3的相互连接的四个脚;支架固定架6可由不锈钢方管或其他材料焊接成带四个脚的两个正交的长方形框架。将圆锅固定架5焊接或者通过螺丝固定在支架2的下边框正上方,将支架固定架6焊接或者通过螺丝固定在支架2的下边框正下方;将圆锅3锅面向上通过圆锅固定架5固定在支架2上;将摄像头1正对圆锅3固定在支架2上边框的正下方,保证摄像头1的摄像范围能包含圆锅3;将图像捕捉卡和加密狗安装在计算机上,将摄像头1通过视频信号电缆与图像捕捉卡连接。为了加强本装置的稳定性,可在圆锅固定架5的四个脚各加装一个橡胶垫4;在支架固定架6的四个脚各加装一个脚垫7即成。
软件部分由“PD300B大鼠旋转跟踪软件系统”构成。
2 装置的安装
2.1 硬件部分的安装
(1)关闭计算机后,切断主机电源。打开计算机机箱盖,把系统所配的图像捕捉卡插入主板的PCI插槽中,并用螺钉将其固定。
(2)将锅型实验平台与固定支架放置在适当位置后,将摄像头用视频信号电缆与计算机上的捕捉卡相联接并接上摄像头电源线。
(3)将加密狗安装在计算机的并口(即打印机接口)上。
(4)安装计算机机箱盖,把计算机安放到平时正常使用的位置。
2.2 软件部分的安装
(1)启动Win2000/XP,系统提示找到新硬件并提示安装其驱动程序,此时选择安装MazeSystem驱动程序和工具7200DriverS7200NT.inf文件。再按提示操作即可。
(2)在Win2000/XP下用鼠标点击安装光盘上MazeSystem目录下的PD300B_Setup.exe文件,然后根据屏幕提示操作就可很方便地完成分析系统软件部分的安装。安装结束后软件在桌面上自动生成快捷方式,用户可双击桌面“PD300大鼠旋转跟踪系统”图标来启动软件。
(3)点击安装光盘上“MazeSystem驱动程序和工具加密狗2000驱动安装程序”目录下的INSTDRV.EXE文件进行加密狗软件部分的安装。
(4)点击安装光盘上“MazeSystem驱动程序和工具mp4plug_in”目录下的install.cmd文件安装录像播放插件。
3 装置的使用
本装置使用时,在实验鼠的头部固定一标记,将实验鼠放入光滑的圆锅3内,让实验鼠在圆锅3内自主旋转;打开计算机,接通摄像头电源;由摄像头1记录实验鼠的旋转行为,并通过视频信号电缆将数据传输给图像捕捉卡,进而借助计算机软件分析标记的运动情况,实验人员只需启动软件进入软件主界面后根据实验需要设定所需的相关参数,点击“开始实验”后便可通过显示屏清楚地观察到实验鼠的旋转情况,无需守在实验鼠的旁边,这样可减少对实验鼠行为学的影响,使结果更加客观准确,待实验时间结束后,系统便会自动停止实验。并准确地记录了实验鼠的旋转方向和旋转圈数,如果中途需要停止实验,只需点击“停止实验”。总之,实验人员可以根据实验需要进行选择和设定。本装置操作简便,检测结果准确,另外还具有录像功能,可根据需要进行选择(见图2)。
4 结束语
本装置是将硬件和软件有机结合而研制出的一种用于检测大鼠旋转行为的装置,采用视频摄像跟踪技术,实现了实验过程的自动化,避免了人工计数引入的主观误差和对实验动物的干扰,增加了实验结果的真实性和可靠性,是从事帕金森病研究的工作人员比较理想的检测仪器,其具有非常广泛的市场开发前景和应用价值。
参考文献
[1]McCoy MK,Martinez TN,Ruhn KA,et al.Blocking soluble tumor necrosis factor signaling with dominant-negative tumor necrosisfactor inhibitor attenuates loss of dopaminergic neurons in models of Parkinson's disease[J].J Neurosci,2006,26(37):9365-9375.
[2]Putterman DB,Munhall AC,Kozell LB,et al.Evaluation of levodopa dose and magnitude of dopamine depletion as risk factors for levodopa-induced dyskinesia in a rat model of Parkinson's disease[J].J Pharmacol Exp Ther,2007,323(1):277-284.
[3]杨素芬,杨正钦,吴芹,等.EGb防治PD的实验研究[J].遵义医学院学报,2001,24(3):206-208.
[4]Chopin P,Colpaert FC,Marien M.Effects of alpha-2adrenoceptor agonists and antagonists on circling behavior in rats with unilateral6-hydroxydopamine lesions of the nigrostriatal pathway[J].J Pharmacol Exp Ther,1999,288(2):798-804.
[5]徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,1991:689-690.
[6]王克权,张进禄,徐群渊,等.BIN-1型大鼠帕金森病旋转记录仪的研制[J].医疗设备信息,1995,10(4):1-3.
[7]李德鹏,徐群渊,张进禄,等.MPTP处理的小鼠和6-OHDA损毁的大鼠帕金森病模型病理变化的比较[J].中风与神经疾病杂志,1999,16(2):79-82.
大鼠行为学 第7篇
关键词：肾虚型自然流产模型,子代生长发育,子代行为学
目前, 大量的研究证实, 母鼠妊娠期间暴露于一些特殊环境, 接触一些特殊物质, 会对其子代生长发育及行为学产生影响。如刘艳华等[1]、刘婉华等[2]、丁淑瑾等[3]等均证实了这一点。基于以上认识, 该研究20112013年从中医角度, 肾虚型自然流产模型大鼠进行不同干预处理, 从而观察其子代生长发育及行为学的影响, 现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
羟基脲 (规格:10 mg20片/盒, 国药准字:H37021289) ;助孕丸 (规格:36 g/瓶;达芙通地屈孕酮片, 规格:10 mg20片/盒, 批准文号:H20090470) 。
1.2 动物
SPF级雄性SD大鼠5只, 购自中山大学实验动物中心, 合格证号:0112829;SPF级雌性SD大鼠14只, 购自广东省医学实验动物中心, 合格证号:0116331;饲养于广州中医药大学第一附属医院SPF级实验中心, 检疫合格后于标准条件 (22~25℃, 14 h照明) 下饲养。
2 方法
2.1 分组
按随机数字表将雌性大鼠分为5组, 模型组 (3只) 、低剂量助孕丸组 (3只) 、高剂量助孕丸组 (3只) 、达芙通组 (3只) , 空白组 (2只) 。
2.2 确定妊娠
将雌鼠与雄鼠按2∶1的比例于每晚7点至次日早上7点合笼交配, 第2天7:308:30行阴道涂片检查, 以涂片中发现大量精子确定为妊娠第1天。连续合笼7 d未见大量精子则停止合笼, 14 d后再次合笼。
2.3 造模模型组
妊娠第2~8天早上9点以羟基脲450 mg/ (kgd) 灌胃, 下午4点以生理盐水灌胃;低剂量助孕丸组:妊娠第2~8天上午以羟基脲450 mg/ (kgd) 灌胃, 下午4点以助孕丸3号浓缩干粉3.54g/ (kgd) (成人等效剂量) 灌胃;高剂量助孕丸组:妊娠第2~8天早上8点以羟基脲450 mg/ (kgd) 灌胃, 下午4点以助孕丸3号浓缩干粉7.08 g/ (kgd) (成人等效剂量2倍) 灌胃;达芙通组:妊娠第2~8天早上8点以羟基脲450 mg/ (kgd) 灌胃, 下午4点以达芙通3 mg/ (kgd) 灌胃;空白组:妊娠第2~8天早上8点及下午4点均以生理盐水450 mg/ (kgd) 灌胃。
造模完成后妊娠母鼠于孕18 d独立分笼, 于孕 (21±2) d产下子鼠, 产下子鼠当天确定为出生第1天。
2.4 指标监测
(1) 母鼠怀孕及产子情况; (2) 子鼠体重:对子鼠出生第1、7、13、19天分别称重; (3) 初生鼠翻身实验:对子代初生鼠于当天做翻身实验, 方法是将初生鼠四脚朝天, 背于实验台, 观察在10 s内能翻身者, 四脚着地者为翻身成功, 否则为失败; (4) 平行爬杆距离及跌落次数:将3周子鼠置于直径约2 cm的钢管上, 用秒表计算1 min内爬行距离及跌落次数。
2.5 统计方法
所有计量数据均以 (±s) 表示, 运用SPSS15.0统计软件对数据进行分析, 组间比较采用ANOVA分析。
3 实验结果
3.1 不同干预组产子情况
模型组产子 (7.50±0.500) , 低剂量助孕丸组 (12.00±1.000) , 高剂量助孕丸组 (10.00±1.000) , 达芙通组 (5.00±1.000) , 空白组 (9.00±0.000) 。
3.2 子鼠体重
经统计, 不同干预组子鼠在D1平均体重差异无统计学意义 (P=0.500>0.05) , D7、D13、D19差异有统计学意义。与模型组比较, D7, 达芙通组高于模型组, 差异有统计学意义 (P=0.003<0.01) , 空白组高于模型组, 差异有统计学意义 (P=0.002<0.01) , D13, 空白组高于模型组, 差异有统计学意义 (P=0.006<0.01) , 达芙通组高于模型组, 差异有统计学意义 (P=0.000<0.01) , D19, 空白组高于模型组, 差异有统计学意义 (P=0.005<0.01) , 高剂量助孕丸组高于模型组, 差异有统计学意义 (P=0.030<0.05) , 达芙通组高于模型组, 差异有统计学意义 (P=0.000<0.01) 。与空白组相比较, D7, 空白组高于模型组, 差异有统计学意义 (P=0.002<0.01) , 空白组高于高助孕丸组, 差异有统计学意义 (P=0.001<0.01) ;D13, 达芙通组高于空白组, 差异有统计学意义 (P=0.000<0.01) , 高助孕丸组高于空白组, 差异有统计学意义 (P=0.000<0.01) , 低助孕丸组高于空白组 (P=0.001<0.01) , D19, 达芙通组高于空白组, 差异有统计学意义 (P=0.001<0.01) , 空白组高于低剂量助孕丸组, 差异有统计学意义 (P=0.001<0.01) 。见表1。
注*:P<0.01, 不同组间子鼠出生第7天体重比较;#:P<0.01, 不同组间子鼠出生第13天体重比较;P<0.01, 不同组间子鼠出生第19天体重比较;▲:P<0.01, 与模型组比较;●:P<0.01, 与空白组比较。
3.3 子鼠行为学实验及比较
3.3.1 初生鼠翻身实验
成功率:模型组 (0.60±0.507) , 低剂量助孕丸组 (0.52±0.511) , 高剂量助孕丸组 (0.78±0.411) , 达芙通组 (0.00±0.000) , 空白组 (0.44±0.527) 。经统计, 差异有统计学意义 (F=2.237, P=0.076) , 不同干预组初生翻身实验结果无显著差异。
3.3.2子鼠平行爬杆实验爬行距离
模型组 (35.00±25.386) , 低剂量助孕丸组 (67.86±42.416) , 高剂量助孕丸组 (32.44±19.648) , 达芙通组 (122.40±38.017) , 空白组 (86.67±43.116) 。经统计, 差异有统计学意义 (F=8.380, P=0.000) , 不同干预组平行爬杆实验爬行距离有显著差异。达芙通组高于模型组 (P=0.000) , 空白组高于模型组 (P=0.001) , 低剂量助孕丸组高于模型组 (P=0.008) , 空白组高于高剂量助孕丸组 (P=0.002) 。
3.3.3 子鼠平行爬杆实验跌落次数
模型组 (2.33±1.345) , 低剂量助孕丸组 (1.61±1.469) , 高剂量助孕丸组 (1.33±1.323) , 达芙通组 (0.00±0.000) , 空白组 (0.11±0.333) 。经统计, 差异有统计学意义 (F=6.203, P=0.000) , 不同干预组平行爬杆实验跌落次数有显著性差异。空白组低于模型组 (P=0.000) , 达芙通组低于模型组 (P=0.001) , 空白组低于低剂量助孕丸组 (P=0.004) 。
3讨论
体重是反映子鼠生理变化的基本指标, 而初生翻身试验、平行爬杆距离、跌落次数是反映子鼠行为症状的基本指标[4]。这些指标一起可以用来评价子鼠生长发育及行为学的情况。邢志强[5]、丁瑜等[6]、张婧等[7]、李学伟[8]的实验发现母鼠妊娠期暴露于一些特殊的物质, 如:氟西汀、邻苯二甲酸、双酚A、氰戊菊酯、会对子鼠的行为学产生影响。张先庚等[9]的实验发现优裕环境母鼠胎教可以增加子鼠的体重、身长, 从而促进子鼠的生长发育;母代的地震恐惧影响可以遗传到子代, 并降低体重和身长, 延缓子代的生长发育:金匮肾气丸可纠正地震恐惧导致的子鼠发育迟缓。王米渠等[10]通过猫吓孕鼠造模“恐伤肾”的实验方法, 对第二代初生鼠、青年鼠、成年鼠的诸种行为遗传测试, 其结果表明受惊恐的子代鼠在“作强” (体力、心力、性力) 行为的活动水平降低。
该实验以罗颂平教授研究团队病证结合肾虚型先兆流产模型为基础, 探索不同干预方法对其子代行为学的影响。该实验的结果提示:母鼠肾虚会影响到子鼠生长发育及行为学, 达芙通、助孕丸能对肾虚型母鼠产下的子鼠的生长发育和行为学起到积极的作用, 这一点与其他实验结果相同, 但助孕丸的剂量仍需斟酌。该实验未从细胞学、分子生物学、免疫学等角度进入深入研究探讨分析, 这一点也是作者将来进一步研究的方向。
参考文献
[1]刘艳华, 刘秋芳.邻苯二甲酸二 (2-乙基) 己酯 (DEHP) 胚胎期暴露对子代大鼠神经行为发育的影响[J].毒理学杂志, 2011, 25 (6) :414-416
[2]刘婉华, 郝红军.不同剂量的He-Ne激光对妊娠母鼠子代的生长及行为的影响[J].激光杂志, 2003, 24 (5) :96-97.
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